简述Sanger双脱氧链终止法的基本原理。（聚丙烯酰胺凝胶电泳模式图）

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第1题：

Sanger法测序的待测模板包括

A、单链DNA

B、双链DNA

C、单链RNA

D、双链RNA

E、任意核酸

参考答案：AB

第2题：

与Sanger双脱氧末端终止法相比，Maxam-Gilbert化学裂解法最明显的优点是

A、不需要加入2＇，3＇-双脱氧核苷三磷酸底物

B、不需要DNA聚合酶的参与

C、不需要进行同位素标记

D、所测序列来自酶促反应的拷贝

E、所测序列来自原DNA分子本身

参考答案：E

第3题：

简述序贯模块法的基本原理?

参考答案：序贯模块法是目前最常用的流程模拟方法。将每一种单元过程建立其相应的数学模型，编成一个单独的计算子程序形成模块。将分隔与断裂的算法也编成模块。按流程顺序将相应的单元过程模块搭接成一个计算信息流程。由分隔断裂模块自动分析断裂的部位及模块的计算顺序。顺序确定后，就一个一个模块地输入。这种算法比较直观，故易为工程师接受，所占用计算机内存少，也易于形成通用化系统。但其缺点是：需要大量迭代计算，特别是对设计型或优化计算，耗费计算机机时太大。

第4题：

SANGER双脱氧链终止法的原理是什么？

正确答案: DNA链中核苷酸以3’，5’-磷酸二酯键连接，合成DNA所用的底物是2’-脱氧核苷三磷酸。2’，3’ddNTP与普通dNTP不同，它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中，但由于没有3’羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，因此，正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP，链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争，产物是一系列的核苷酸链，其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP，结果将产生4组寡核苷酸，它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。

第5题：

Sanger双脱氧链终止法采用DNA引物引导新生DNA的合成，采用的模板是（）

A、单链DNA
B、双链DNA
C、单链RNA
D、双链RNA
E、蛋白质

正确答案:A,B

第6题：

Sanger双脱氧终止法对DNA测序时,下列哪种核苷酸的加入会使DNA链延长终止()

A、dGTP

B、dTTP

C、dCTP

D、Datp

参考答案：C

第7题：

简述真空脱氧的基本原理，并说明经过该工艺处理后，海水中含氧量可降到多少m/L以下？

正确答案: 其原理是依靠真空设备提供的真空压力，降低塔内的气体分压，使海水中的溶解的气体逸出，并被抽出，从而达到除去海水中的溶解气体的目的。
一般真空脱氧可以使海水中含氧量降到0.05m/L以下。

第8题：

简述时间标签法基本原理

参考答案：时间标签法测距是基于EPON系统时间标签同步的。时间标签法测距即通过时间标签的传递，通过接收的时间标签值和本地时钟计数器时间标签差值来实施测距。

第9题：

简述利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？

正确答案: 原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP，结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP，使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。

第10题：

试简述扩散脱氧法熔炼钢水时所使用的脱氧剂，以及该法的优缺点？

正确答案:在熔炼后期，把脱氧剂加入炉渣中，降低渣中氧化亚铁的含量。向炉渣中加入的脱氧剂有，碳粉、硅铁粉、铝粉及石灰的混合物。他们把渣中的氧化亚铁还原，生成的一氧化碳则逸入炉气。二氧化硅和三氧化二铝则会使炉渣变稀，石灰则可以起稠化炉渣的作用。这种扩散脱氧的过程，主要是在炉渣和渣钢表面上进行的，脱氧剂和脱氧产物也在炉渣中，不会混入钢水内，使钢水纯净，钢的质量较高。主要缺点是使扩散过程慢，消耗时间长，影响生产效率以及所使用的脱氧剂较多等。

简述Sanger双脱氧链终止法的基本原理。（聚丙烯酰胺凝胶电泳模

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