简述如何预防植物组织培养中产生玻璃化现象？

题目

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第1题：

玻璃化现象

正确答案:是指植株矮小肿胀，失绿，叶、嫩梢呈水晶透明或半透明，叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎等组织畸形的现象。

第2题：

植物组织培养的理论依据是什么？其优点如何？

正确答案: 组织培养是指在无菌条件下，分离并在培养基中培养离体植物组织的技术。
其理论依据是细胞全能性。
优点在于：可以研究外植体在不受植物体其他部分干扰下的生长和分化的规律，并且可以用各种培养条件影响它们的生长和分化，以解决理论上和生产上的问题。
特点：
取材少，培养材料经济，可人为控制培养条件，不受自然条件影响；
生长周期短，繁殖率高；
管理方便，利于自动化控制。

第3题：

简述如何预防植物组织培养中的污染？

正确答案: （1）防止材料带菌：①必要时在室内或无菌条件下对接种的枝条先进行预培养。②避免阴雨天在田间采取外植体。③在菌类侵入组织内部时除去韧皮组织，只接种内部的分生组织。
（2）外植体灭菌多次灭菌法或多种药液交替浸泡，常用后者。如：取茎尖、芽或器官作为外植体，预处理后剥去芽上鳞片；然后，将材料放入70%~75%的医用酒精中灭菌数秒钟；再用1：500RoccalB（一种商品灭菌剂名）稀释液中浸5min；放入5%~10%次氯酸钠溶液中，并滴入“吐温80”数滴，灭菌15~30min；最后用用无菌水冲洗5次。或用前一题中介绍的方法来灭菌。
（3）各种器皿、用具、用品灭菌玻璃器皿可采用湿热灭菌法或干热灭菌法、煮沸法灭菌。金属器械一般用火焰灭菌法或干热灭菌法灭菌。工作服、口罩、帽子等布质品用湿热灭菌法。
（4）无菌操作室灭菌久不使用的接种室用2%的新洁尔灭或70%的酒精擦洗，并用70%的酒精喷雾，使空间灰尘落。使用前熏蒸消毒或用紫外灯消毒。
（5）操作人员在接种时严格按照无菌操作的程序进行。

第4题：

如何减轻试管苗玻璃化现象？如何防止外植体的真菌污染？

正确答案: （1）利用固体培养方法，增加琼脂浓度，降低培养基中的渗透势，造成细胞吸水阻遏。或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂，减少培养基中植物材料可获得的水分，这也可以抑制玻璃化的发生。
（2）适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度。或者，适当增加培养基中Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、Cu、Zn元素含量，降低N和CL元素比例，特别是降低胺态氮的浓度，提高硝态氮量。
（3）增加自然光照。因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟。
（4）改善培养器皿的气体交换状态封口膜。
（5）在培养基中添加其他物质。如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率。

第5题：

植物组织培养的难题是褐变、（）、污染及变异现象。

正确答案:玻璃化

第6题：

下列有关植物细胞工程应用的叙述错误的是（）

A、植物微型繁殖具有高效、快速的特点
B、用组织培养技术繁殖的植物体不产生突变
C、用单倍体育种可明显缩短育种年限
D、利用组织培养中获得的胚状体可制造人工种子

正确答案:B

第7题：

简述植物组织培养的三大难题是什么，并加以解释。

正确答案: 植物组织培养的三大难题是污染、褐变、玻璃化。
污染是指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。褐变是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散致使培养基逐渐变成褐色，而且会抑制其他酶的活性，严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。玻璃化是指培养的植物会生长出肿胀、扭曲的叶片，这种叶片不可逆地变成半透明状并最终坏死，这种情况下会导致苗的死亡。

第8题：

简述如何预防植物组织培养中产生褐变？

正确答案:①选择适宜的外植体。
②配制最佳培养基，适当降低无机盐和细胞分裂素的浓度，并加入抗氧化剂和活性碳。
③创造适宜的培养条件。在初始培养的1~6周内用暗培养，或在150lx左右的光强下进行光培养。另外，在整个培养过程中控制好温度，适当降低光照强度。
④连续转移用。

第9题：

如何减轻植物组织培养中试管苗玻璃化现象？

正确答案: 在组织培养过程中，经常会发现不定芽丛或者试管苗畸形生长，茎叶呈半透明水渍状，叶片失绿、皱缩，并沿纵向卷曲，脆弱易碎，叶表面完全无蜡质，称之为“玻璃化现象”。这种“玻璃苗”细胞丧失持水能力，细胞内水分大量外渗，增加了植株水分的散失和蒸腾，是组织培养中一种生理失调或生理病变，它极易引起植株死亡，很难移植成活，已成为茎尖脱毒、工厂化育苗等方面的严重障碍。为了更好解决“玻璃化现象”，可以：
（1）适当提高培养基中的琼脂、蔗糖或其他渗透剂的浓度，降低培养基的衬质势。
（2）可在培养基中加入适量生长延缓剂，例如ABA、PP333，并降低培养基中含氮量和细胞分裂素、赤霉素浓度。
（3）增加培养容器的透气性，并避免容器底部受下层日光灯的加热，使容器底部适当降温造成容器内的湿度有自上而下的梯度。
（4）控制培养室内温度，可对培养材料适当进行低温处理。
（5）增加自然光照。

第10题：

接种是组织培养过程中易于（）的一个环节，操作必须在无菌条件下进行。

A、褐化
B、玻璃化
C、成功
D、污染

正确答案:D

简述如何预防植物组织培养中产生玻璃化现象？

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