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酶的分离纯化应注意的问题有哪些？

题目

酶的分离纯化应注意的问题有哪些？

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相似问题和答案

第1题：

小型空分设备改用分子筛纯化器净化空气时，应注意哪些问题？


正确答案: 实践证明，将碱洗塔-干燥器清除二氧化碳、水分的旧净化流程改为用分子筛纯化器净化空气是完全必要的。在改用分子筛纯化器时，对以下几个问题应引起注意：
1）应特别注意空气压缩末级冷却器的冷却效果。由于空气经末级冷却器后直接进入分子筛纯化器，末级冷却器的冷却效果对分子筛纯化器的工作温度有直接影响。分子筛工作温度越高，吸附能力越差。同时，温度越高，空气中含水量也越多。例如，当空气压力为2.2MPa，温度为40℃时，其饱和含水量为2.31g/m3；30℃时则为1.38g/m3；20℃时降为0.79g/m3。纯化器工作温度越高，工作周期就越短。如果纯化器工作温度过高，两台纯化器就有可能来不及倒换。因此，当末级冷却器效果差时，需设法改进，也可另增设一台冷却器与之串联。如果原用冷却水温度高，可考虑改用深井水冷却。
2）应设法降低进热交换器前（即出分子筛纯化器后）空气的温度。由于分子筛吸附空气中水分和二氧化碳时产生吸附热，出纯化器时的空气温度升高。特别是在切换后最初的10～40min，出口温度上升的幅度最大，空气进、出吸附器温度的最大差值可达16～17℃。如不设法降温，势必使进热交换器前的空气温度上升，影响分馏塔的工作。因此，在纯化器后可增设一台冷却器。该冷却器可用铜管，也可用钢管制作，浸于流动的水槽内即可。
3）防止分子筛粉末。应设法过滤掉分子筛粉末，以免被带进分馏塔，否则将会破坏精馏塔的工作。为此，需在空气出纯化器的冷却器之后、进热交换器之前，设置一个粉末过滤器。该过滤器可用二氧化碳过滤器的陶瓷管改制。
4）应预先除油。尽可能将压缩空气中的机油在进纯化器之前，预先吹除和过滤掉，以免分子筛被油污染后，降低其对水分和二氧化碳的吸附效果。例如，在纯化器前面，可将两个油水分离器和一个棉纱滤油器串联使用。
5）应尽可能地采用球形5A分子筛作吸附剂。其优点是：受气流冲击时粉碎率小；在同体积内可装填的分子筛量多。例如在一台内径为φ480mm、筒体长1700mm，封头高165mm的吸附器内，可装填球形分子筛260kg；而装填条形分子筛时，只能装填190kg。
6）应制造结构合理的电加热炉。由于分子筛加热再生所需温度较高，如果电加热炉结构不合理，就会经常发生电炉筒体被烧穿，或电阻丝被烧断等事故。

第2题：

以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质，在选择分离纯化方法时应注意哪些问题？


正确答案:（1）根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质；
（2）根据蛋白质分子形状和大小的不同来纯化蛋白质；
（3）根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋白质；
（4）根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质；
（5）根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质；
（6）根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来纯化蛋白质；
（7）根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白质；
（8）根据蛋白质选择性吸附性质来纯化蛋白质；
（9）根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化。

第3题：

防止分离塔底结焦应注意哪些问题？


正确答案: （1）控制好分馏塔底温度；
（2）保持一定的塔底循环量；
（3）在塔底过滤器差压上升时，应及时清理过滤器中的焦粉；
（4）若塔底循坏泵不能维持正常循环量，应采取措施，以保持塔底渣油的流动。

第4题：

酶提取和分离纯化的方法有哪些？


正确答案: （一）根据酶分子溶解度不同的方法
（1）盐析沉淀法
（2）等电点沉淀法
（3）有机溶剂沉淀法
（二）根据酶分子大小和形状不同的方法
（1）离心分离法
（2）体积排阻法
（3）超滤
（三）根据酶分子电荷性质的方法
（1）离子交换层析
（2）等电聚焦电泳
（四）根据酶分子专一性结合的分离方法
（1）亲和层析

第5题：

酶的分离纯化技术有（）、（）、（）等。


正确答案:选择性沉淀技术；层析技术；膜分离技术

第6题：

改用分子筛纯化器净化空气后，操作中应注意哪些问题？


正确答案: 操作中应注意以下几个问题：
1）操作压力略需升高一些。至于升高多少，要根据改用分子筛纯化器时，是沿用原有干燥器所用阀门，还是改用大口径阀门；是用原干燥器管路，还是将管路加粗而定。如果阀门改大，管路加粗，操作压力升高就少。如果利用原有干燥器的阀门与管路，上塔压力将上升约0.01MPa，下塔压力也将相应上升。否则在预定的时间内，分子筛纯化器的再生温度达不到要求。
2）要严格控制分子筛纯化器的再生温度。加热氮气出加热炉温度不能过高，也不能过低，一般控制在280～320℃。温度太高，电炉易出故障；温度太低，加热再生周期会延长。加热氮气出纯化器温度升至110℃即可停止加热。切断电炉电源后，加热氮气出纯化器温度还可升至130℃以上。
3）倒换分子筛纯化器时，应使空气从上面充入。分子筛最初装填时虽已装满，但经运转振动后，上部会产生空隙。如果在倒换时空气由下面充入，就会引起分子筛上下跳动，产生摩擦和粉碎。
4）分子筛纯化器倒换时要缓慢，以免造成分馏塔工况波动，或因气流冲击分子筛而产生粉末。带有氩塔时，更需稳缓倒换分子筛纯化器。
5）长期停车要充氮防潮。在长期停车时，最好将纯化器内充入干氮气保压。以防湿空气侵入分子筛，致使再开车时分子筛净化空气的能力降低。

第7题：

酶的分离纯化包括（）

  • A、抽提
  • B、纯化
  • C、定型
  • D、制剂

正确答案:A,B,D

第8题：

分离纯化蛋白质的意义有哪些？


正确答案:
研究蛋白质的结构与功能：要求纯度高，不变性；
提取活性的酶或蛋白质：必须保持天然活性状态；
作为药物或食品添加剂：纯度要求一般。
一般步骤：材料的选择—原料的预处理—蛋白质的提取—从抽提液中沉淀蛋白质—纯化—蛋白质的结晶。超二级结构：又称模体，是指二级结构单元进一步聚集和组合在一起，形成规则的二级结构聚集体。其形成进一步降低了蛋白质分子的内能，使其更加稳定，它是蛋白质在二级结构基础上形成三级结构时经过的一个新的结构层次。

第9题：

酶分离纯化中，胞外酶需将细胞破碎.


正确答案:错误

第10题：

分离纯化酶有哪些常用方法，根据是什么？


正确答案: 酶的分离纯化工作主要是，将酶从杂蛋白中分离出来或者将杂蛋白从酶溶液中除去。现有的酶分离纯化方法都是依据酶和杂蛋白在性质上的差异而建立的。
1、根据分子大小而设计的方法，如离心分离法、筛膜分离法、凝胶过滤法等。
2、根据溶解度的大小分离的方法，如盐析法，有机溶剂沉淀法，共沉淀法，选择性沉淀法，等电点沉淀法。
3、按分子所带正负电荷的多少分离的方法，如离子交换分离法，电泳分离法，聚焦层析法等。
4、按稳定性差异建立的分离方法，如选择性热变性法，选择性酸碱变性法，选择性表面变性法等。
5、按亲和作用的差异建立的分离方法，如亲和层析法，亲和电泳法。
5.酶分子修饰的方法及意义
通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。
酶分子的修饰方法分为化学法、生物法和物理法。化学法又可分为金属离子置换法、肽链有限水解法、蛋白质侧链基团的小分子修饰法等。生物法是通过基因工程的手段改变蛋白质，即基于核酸水平对蛋白质进行改造，利用基因操作技术对DNA或mRNA进行改造和修饰，以期获得化学结构更为合理的蛋白质。物理法的特点是不改变酶的组成和基团，酶分子的共价键不发生变化。

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