体外培养细胞属悬浮型生长方式的细胞是
A、心肌细胞
B、血管内皮细胞
C、平滑肌细胞
D、血液中的淋巴细胞
E、肝细胞
体外培养细胞可分为贴壁生长和悬浮生长两大类，属于悬浮生长的细胞是
A、成纤维细胞
B、白血病细胞
C、鼻咽癌细胞
D、淋巴瘤细胞
E、脑胶质瘤细胞
以下MDS患者CFU-GM培养结果，预后最好的是
A．细胞簇与集落数比值正常
B．细胞簇与集落数比值增高
C．生长型为小细胞型
D．细胞培养为大细胞簇型
E．细胞培养为无生长型
-. z.第一章 绪论课后习题答案1. 动物细胞工程主要有哪些内容？这些技术有何用途？答：1. 组织和细胞培养技术2. 细胞融合与单克隆抗体技术3. 细胞核移植技术4. 胚胎工程技术5. 干细胞技术6. 转基因技术7. 染色体工程细胞工程的应用有：A. 单克隆抗体的应用：疾病诊断与治疗、微量大分子物资的检测、贵重生物活性物的别离与提纯、特殊疾病治疗、与药物交联治疗疾病；B. 转基因技术的应用：建立疾病的动物模型、品种改进和抗病育种、乳腺生物发应器、基因代替治疗、异种器官移植、基因功能研究；C. 细胞与组织替代治疗；D. 治疗人类不孕症；E. 优良品种繁育；F. 生产转基因家畜；G.保护濒危动物。追踪动物细胞工程研究与应用的最新进展，并预测其开展趋势。第二章 细胞培养1、体外培养细胞有哪些类型？其生长特点有什么区别？答：体外培养的细胞根据其生长方式，主要分为贴壁生长型细胞和悬浮生长型细胞。离体细胞必须贴附于底物上才能生长的细胞称为贴壁生长型细胞。有机体的绝大局部细胞必须贴附在*一固相外表才能生存和生长。动物细胞培养中，大多数细胞必须贴附在固相外表才能生长，当细胞布满外表后即停顿生长。从生长外表脱落进入液体得细胞通常不再生长而逐渐退化，这种细胞称为单层附壁细胞。贴壁生长的细胞在活体体内时，形态各异，而体外培养状态下则在形态上比拟单一而失去其在体内时原有的特征。按照培养细胞的形态，主要可分为以下几类：成纤维细胞型、上皮型细胞、游走型细胞、多形型细胞；少数细胞类型在体外培养时不需要附着于底物而于悬浮状态下即可生长，包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞，如血液白细胞、淋巴组织细胞、*些肿瘤细胞、杂交瘤细胞、转化细胞等，这些细胞在悬浮中生长良好，可以是单个细胞或为细小的细胞团，观察使细胞呈圆形。由于悬浮生长于培养液中，因此其生存空间大，具有能够提供繁殖大量细胞、传代方便、易于收获细胞等优点，易于大规模生产，便于过程的控制。2、细胞系的生长过程包括哪些主要阶段？每一生长阶段各有什么特征？答：进展正常细胞培养时，不管细胞的种类和供体的年龄如何，细胞系的生长过程都经历原代培养期、传代培养期和衰退期或永生化三个阶段。原代培养期也称初代培养期，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续14周，此期细胞呈活泼的移动，可见细胞分裂，但不旺盛。原代培养细胞与体内原组织在形态构造和功能活动相似性较大，细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞，在软琼脂培养基中进展培养时，细胞克隆形成率很低，即细胞独立生存性差。原代细胞生长一定时间后，如是贴附型细胞就会连接成片而铺满瓶底，这时需将原代细胞分开至多个新的培养瓶中，这个过程称为传代。初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。此期细胞增殖旺盛，可见细胞分裂相，并能维持二倍体核型。传代培养细胞与体内原组织在形态构造和功能活动发生较大改变。一般情况下当传代1050次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停顿，细胞进入第三期。衰退期的细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形态轮廓增强，最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段，少数情况下，在以上三期任何一点(多发生在传代末或衰退期)，由于*种因素的影响，细胞可能发生转化。转化的标志之一是细胞可能获得永生性或恶性。细胞永生性也称不死性，即细胞获持久性增殖能力，这样的细胞群体称无限细胞系，也称连续细胞系。3、每代细胞的生长曲线包括哪几个主要时期？各期细胞有何特点？答：每代细胞从开场接种到别离再培养，一般要经过以下阶段：潜伏期、指数(对数)生长期和停顿期(平台期)。细胞接种培养初期，历经悬浮、贴壁及生长加速的阶段。细胞接种培养 后，先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞胞质回缩，胞体呈圆球形。接着是细胞附着或贴附于底物外表上，称贴壁，贴壁出现标志悬浮期完毕。细胞贴附于支持物后，会发生一系列变化，然后还要经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期。细胞处在潜伏期时，可有生长活动，根本无增殖，少见分裂相。潜伏期后，细胞分裂出现，并逐渐增多，标志细胞进入指数生长期。又称对数期。此时细胞生长增殖旺盛，细胞成倍增长，活力最正确，最适合进展实验研究。细胞分裂相增多。细胞分裂相数量可作为判定细胞生长旺盛与否的一个重要标志。在细胞数量达饱和密度后，细胞停顿增殖，进入停顿期。此时细胞数量持平，故也称平台期。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，可继续存活一段时间。该时期细胞形态轮廓增强，最后开场衰退死亡。4、什么是原代培养与传代培养？原代细胞培养有哪些方法？各自的适用*围是什么？答：原代培养也称初代培养期，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续14周。传代培养是指原代细胞生长一定时间后，如是贴附型细胞就会连接成片而铺满瓶底，这时需将原代细胞分开至多个新的培养瓶中，这个过程称为传代，初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。课本55页原代细胞培养的方法有：组织块培养法、单层细胞培养法、悬浮细胞培养法。组织块培养法特别适合于组织量少的原代培养；单层细胞培养法尤其适用于细胞建系和大量组织的培养，用于少量培养工作时稍显繁琐；悬浮细胞培养法对悬浮生长的细胞如白细胞、骨髓细胞和胸水、腹水等癌细胞，可直接接种进展原代培养。5、常用的组织细胞别离方法有哪几种？答：分散组织的方法有机械法别离和消化别离法两种；根据组织种类和培养要求，宜采用相应的方法。(1). 机械别离法：A.离心别离法B.切割别离法C.机械分散法；(2). 消化别离法：A.胰蛋白酶消化法B.胶原酶消化法C.EDTA螯合剂消化法6、贴壁细胞传代时采用何种方法？其技术关键是什么？答：贴壁细胞传代时采用消化别离法，其技术关键是把握好传代时机，消化时间要适度，消化液浓度要适宜，传代的细胞接种数量可适当多一些，使细胞能尽快适应新环境而利于细胞生存和增殖，局部贴壁生长细胞不经消化处理直接进展吹打也可使细胞从壁上脱落下来，而进展传代。7、常用的细胞克隆化方法有哪些？简述其主要技术环节答：主要方法有：稀释铺板法、饲养层克隆法、琼脂克隆法、毛细管克隆法、荧光激活分选法等。稀释铺板法：也称为有限稀释法。其原理是通过适当的稀释到达别离单个细胞的目的。将培养的细胞进展计数，用培养液进展稀释到510个细胞/ml后，在多孔培养板(一般为96孔板)各孔内分别参加细胞悬液0.10.2 ml，使孔内落入细胞的几率为每孔一个细胞。镜检每孔所含细胞数，标记含单个细胞的孔，培养一段时间后，凡在已标记的孔中有生长增殖的细胞群即为克隆细胞。常规使用中，一般不、进展镜检，多采用屡次克隆化培养得到单细胞的克隆系。饲养层克隆法： 对一些生长缓慢的细胞(如杂交瘤细胞) ，单个细胞或密度极低时细胞难以存活和增殖，在培养皿中参加能贴壁生长的其他细胞称为饲养细胞，这些细胞不仅能起到饲养作用，还能去除培养体系中的死、伤细胞及其碎片。饲养细胞的存在可以促进单个细胞生长为细胞克隆，到达克隆化目的。常用的饲养细胞有成纤维细胞、胸腺细胞和巨噬细胞。巨噬细胞不仅能起饲养作用，还能去除培养体系中死、伤细胞及其碎片。琼脂克隆法：将细胞培养在软琼脂形成的半固体培养基上，单个细胞可在半固体的培养基上增殖形成集落。常用的软琼脂法是在培养皿中先铺一层0.5%的琼脂，待凝固后再铺一层0.、25%的软琼脂，参加的细胞数要在几率上使长出的集落是一个细胞的后代。长出集落后，再转移到其他培养器中进展扩增分析。毛细管克隆法：毛细管克隆细胞法是最早的单细胞别离培养技术。其根本过程是：在倒置显微镜下，用弯头毛细管或借助显微操作仪将细胞逐个吸出，分别放入96孔板内培养形成克隆。本法虽比拟准确，但过程较繁琐，成功率低，现已少采用。荧光激活分选法：将细胞标上荧光，当细胞悬液流经激活分选仪喷嘴时形成含有单细胞的液滴，细胞受激光照射发出荧光和前向散射光。通过仪器分析，使细胞带上电荷并使细胞流动方向发生偏移，各个含单细胞的液滴被分别收集在96孔板各孔内，以到达克隆化的目的。8、常用的动物细胞大规模培养主
动物乳腺反应器是指（）
关于现代生物技术应用的叙述，错误的是（）
体外培养中，贴壁型细胞大致分为（）、（）、（）和（）。
细胞培养的体外生长环境：（）、（）、（）、（）。
根据动物细胞类型及其生长特性的不同，动物细胞培养方法包括（）、（）、（）。