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何谓盐析？其原理是什么？常用的盐析方法有哪些？影响盐析的主要因素有哪些？盐析操作时常用的盐是什么？

题目
问答题
何谓盐析？其原理是什么？常用的盐析方法有哪些？影响盐析的主要因素有哪些？盐析操作时常用的盐是什么？
参考答案和解析
正确答案： （1）盐析法是利用各种生物分子在浓盐溶液中溶解度的差异，通过向溶液中引入一定数量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀析出，达到纯化目的的方法。
（2）原理：盐溶现象和盐析作用 盐析作用的原理是：
破坏双电层：在高盐溶液中，带大量电荷的盐离子能中和蛋白质表面的电荷，使蛋白质分子之间电排斥作用相互减弱而能相互聚集起来。
破坏水化层：中性盐的亲水性比蛋白质大，盐离子在水中发生水化而使蛋白质脱去了水化膜，暴露出疏水区域，由于疏水区域的相互作用，使其沉淀。
（3）影响盐析的因素
①无机盐的种类
盐析用盐的选择：盐析作用要强
盐析用盐需有较大的溶解度 盐析用盐必须是惰性的 来源丰富、经济
②溶质（蛋白质等）种类：Ks、β
③溶质（蛋白质等）浓度：2~3%
④温度
⑤pH
（4）盐析中常用的盐：硫酸铵、硫酸钠、磷酸钾、磷酸钠。
硫酸铵是最常用的蛋白质盐析沉淀剂
解析： 暂无解析
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第1题：

盐析法是分离提纯蛋白质过程中常用的方法之一，常用的主要盐析试剂是（）、（）和（）。


正确答案: (NH4)2SO4；NaCl；Na2SO4

第2题：

盐析法最常用的中性盐是（）。


正确答案:硫酸铵

第3题：

影响盐析的主要因素有哪些？在工艺设计中如何应用？


正确答案: 用Cohn经验公式来看
lgS=-β--KsI
影响盐析的主要因素有：
β：与蛋白质种类、温度、pH有关，与无机盐种类无关
Ks：与无机盐种类、蛋白质种类（不同蛋白之间溶解度相差不超过1倍）有关，与温度、pH无关。

第4题：

影响盐析的主要因素有哪些？


正确答案: （1）离子强度：Ks和β值，强度越大，蛋白质溶解度越小；
（2）蛋白质的性质：因相对分子质量和立体结构而异，结构不对称、相对分子质量大的蛋白质易于盐析；（3）蛋白质的浓度：蛋白质浓度大，盐的用量小，共沉作用明显，分辨率低；蛋白质浓度小，盐的用量大，分辨率高；2.5%～3.0%时最适合；
（4）pH值：通常调整到pI附近，盐浓度较大会对等电点产生较大影响，pH对不同蛋白质的共沉影响；
（5）温度：低盐浓度下，温度升高蛋白质溶解度升高；高盐浓度下，温度升高，多数蛋白质和肽溶解度反而下降。对于特定的蛋白质，影响蛋白质盐析的主要因素是：无机盐的种类、浓度、温度和pH值。

第5题：

盐析的原理及影响因素是什么？


正确答案: 1、亲水性大于蛋白质破坏水化层
2、带电离子中和蛋白质表面电荷
影响因素：
（一）盐离子浓度
（二）生物分子种类
（三）生物分子浓度
（四）pH值
（五）温度

第6题：

常用的盐析用盐：（）、（）、（）、（）。


正确答案:硫酸铵；硫酸钠；磷酸盐；柠檬酸盐

第7题：

盐析法的原理是什么？


正确答案:在高浓度中性盐存在的情况下，蛋白质等生物大分子在水溶液中的溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。

第8题：

蛋白质盐析的过程中会有什么现象发生，其原理是什么？


正确答案: 会相继出现盐溶和盐析现象。
原因：
盐溶：刚加入无机盐时，蛋白质溶液无机盐浓度较低，蛋白质吸附无机反离子会促使蛋白质分子间相互排斥，蛋白质分子与水分子间的相互作用加强，因而蛋白质的溶解度增大。
盐析：但当继续加入电解质时。蛋白质溶质无机盐浓度较高，使蛋白质表面的扩散层厚度和z电势降低，静电排斥作用减弱，破坏了蛋白质胶体的稳定性；盐离子的水化作用降低了自由水的浓度，使疏水区附近的水分子离开蛋白质表面周围，从而破坏了蛋白质表面的水化膜，暴露出疏水区域，从而增大了疏水区相互作用而使蛋白质聚集、沉淀。

第9题：

影响盐析的因素有哪些？


正确答案: ⑴盐饱和度的影响
⑵蛋白质浓度的影响
⑶pH的影响
⑷温度的影响

第10题：

通常，在蛋白质盐析时，般粗提蛋白质时，常用（）分级盐析法；进一步分离、纯化用（）分级盐析法。


正确答案:Ks；β

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