简述PCR反应体系,实验中注意的问题。

题目
问答题
简述PCR反应体系,实验中注意的问题。
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相似问题和答案

第1题:

进行PCR扩增DNA时反应体系应加入什么物质?


参考答案:模板DNA、耐高温的DNA聚合酶、引物、PCR缓冲液、脱氧核苷酸贮备液。

第2题:

简述PCR反应体系主要包括哪些组分。
P.CR反应组分:
①模板(特定序列的DNA分子)。
②两个特异寡核苷酸片段-引物primer,这一对引物位于欲扩增DNA区的两侧,与靶序列两端互补。
③耐热DNA聚合酶Taq酶以及酶的缓冲液-buffer。
④4种脱氧核糖核苷酸dNTP。

第3题:

简述标准的PCR反应体系。


参考答案:


第4题:

简述PCR原理及其基本反应步骤。


正确答案:PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板互补的DNA链。

第5题:

在固定容积的PCR反应体系中,加入越多的模版,PCR反应的效果就会越好。()


正确答案:错误

第6题:

PCR反应体系中不包括的成分是

A、引物

B、模板

C、DNA聚合酶

D、dNTP

E、DNA酶


参考答案:E

第7题:

简述主动反应的含义、原则以及主动反应中应注意的问题。
(一)主动反应的含义:所谓主动反应,是相对于咨询师在倾听过程中的被动反应而言。指咨询师主动地介入会谈过程,从咨询师自身的参考体系出发为来访者提供新的信息,对来访者的问题提出新的解释,带给来访者更有力的影响。
(二)主动反应的原则:
1、要以良好的咨询关系作为基础。
2、要适合来访者接受的水平。
(三)主动反应中要注意的问题:坚持以对来访者的理解作为首要任务;认识到主动反应可能带来的问题。加强理论学习提高实践技能。反思个人的表达习惯。

第8题:

简述PCR反应五要素。


本题答案:参加PCR反应的物质主要有五种即:
①模板DNA,
②寡核苷酸引物,
③dNTP,
④反应缓冲液,
⑤TaqDNA聚合酶。

第9题:

PCR中阳性对照没有出现的原因包括()。

  • A、反应体系配制出错
  • B、阳性对照失效
  • C、反应体系中组分失效
  • D、漏加

正确答案:A,B,C,D

第10题:

简述主动反应的含义与主动反应中应注意的问题。


正确答案: 主动反应的含义:所谓主动反应,是相对于咨询师在倾听过程中的被动反应而言。指咨询师主动地介入会谈过程,从咨询师自身的参考体系出发为来访者提供新的信息,对来访者的问题提出新的解释,带给来访者更有力的影响。
主动反应中要注意的问题:
1.持以对来访者的理解作为首要任务;
2.识到主动反应可能带来的问题。
3.强理论学习提高实践技能。
4.思个人的表达习惯。