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Southern blotting:Southern印迹

题目

Southern blotting:Southern印迹

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相似问题和答案

第1题：

测定蛋白样品中某种相对分子质量的蛋白选用最佳的方法是

A.免疫PCR

B.ELISA法

C.蛋白印迹试验（Western blotting）

D.斑点杂交

E.Southern blotting


正确答案：C

第2题：

常用于研究基因表达的分子生物学技术有
A. Northern blotting B. Southern blotting C. Western blotting D. RT-PCR


答案：A,C,D
解析：
基因表达是基因转录和翻译的过程,太多数基因表达都经历“转录—翻译—产生蛋白质”的过 程，因此研究基因表达就是检测mRNA和蛋白质。Southern blotting(印迹技术）是通过杂交检测DNA的 缺失、插人的方法。Western blotting(免疫印迹技术)是通过杂交检测蛋白质的方法。Northern blotting和 反转录PCR( RT-PCR)分别是通过杂交、逆转录和PCR检测mRNA的方法。

第3题：

RFLP可以用如下方法检测()。

A.Southern印迹杂交和Northern印迹杂交

B.Southern印迹杂交和PCR后酶切

C.PCR后酶切和斑点杂交

D.Southern印迹杂交和原位杂交

E.PCR后酶切和原位杂交


标准答案：B

第4题：

Southern印迹杂交、Northern印迹杂交及Western免疫印迹彼此之间有哪些不同？


正确答案: （1）检测目标物质不同：Southern印迹杂交检测的是DNA，Northern印迹杂交检测是RNA，Western免疫印迹杂交检测的是蛋白质。
（2）所用凝胶不同：Southern印迹杂交和Northern印迹杂交用的是琼脂糖凝胶，而Western免疫印迹用的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶。
（3）是否变性电泳不同：Southern印迹杂交是跑非变性琼脂糖凝胶电泳，电泳之后在凝胶上用NaOH处理使DNA变性，然后转印；Northern印迹杂交实在电泳上样前用甲基氢氧化银、乙二醛或甲醛使RNA变性，而不用NaOH，因为它会水解RNA的2’-OH；Western免疫印迹则是跑变性的聚丙烯酰胺电泳或非变性的聚丙烯酰胺电泳。
（4）探针不同：Southern印迹杂交、Northern印迹杂交的探针是单链的DNA或RNA，而Western免疫印迹用的探针是特异性抗体蛋白质，而非核酸。

第5题：

主要应用于基因组DNA的定性和定量分析的印迹技术是


A. Southern blotting B.Northern blotting C. Western blotting D.immunoblotting


答案：A
解析：
[考点]常用分子生物学技术原理和应用
[分析]Southern blotting 即 DNA 印迹技术，它是从组织或细胞中提取的基因组DNA经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳，将含有DNA区带的凝胶经变性后将DNA转移至NC膜上，转移后加热NC膜使DNA固定于膜上，便可用于杂交反应。DNA印迹技术主要用于基因组DNA 的定量和定性分析，还可用于分析重组质粒和噬菌体。故本题应选A。

第6题：

进行DNA-DNA杂交的方法是

A、Southern印迹法

B、Northern印迹法

C、Western印迹法

D、Eastern印迹法

E、PCR


参考答案：A

第7题：

主要应用于基因组DNA的定性和定量分析的印迹技术是

A.Southern blotting
B.Northern blotting
C.Western blotting
D.immuno blotting

答案：A
解析：
[考点]常用分子生物学技术原理和应用

[分析]Southern blotting即DNA印迹技术，它是从组织或细胞中提取的基因组DNA经限制性内切酶消化后进行琼脂糖凝胶电泳，将含有DNA区带的凝胶经变性后将DNA转移至NC膜上，转移后加热NC膜使DNA固定于膜上，便可用于杂交反应。DNA印迹技术主要用于基因组DNA的定量和定性分析，还可用于分析重组质粒和噬菌体。故本题应选A。

第8题：

简述Southern印迹杂交。


本题答案：是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
其基本原理是：
具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。
由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性，综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图谱。
Southern印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的基本方法是将DNA标本用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段，然后经碱变性，Tris缓冲液中和和高盐下通过毛吸作用将DNA从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上、烘干固定后即可用于杂交。凝胶中DNA片段的相对位置在DNA片段转移到滤膜的过程中继续保持着，附着在滤膜上的DNA与32P标记的探针杂交，利用放射自显影术确立探针互补的每一条DNA带的位置，从而可以确定在众多消化产物中含某一特定序列的DNA片段的位置和大小。(琼脂糖凝胶电泳→硝酸纤维素膜吸印)。

第9题：

Southern印迹是只能用DNA探针检测DNA片段。


正确答案:错误

第10题：

测定蛋白样品中某种相对分子质量的蛋白选用最佳的方法是（）

  • A、免疫PCR
  • B、ELISA法
  • C、蛋白印迹试验（Western blotting）
  • D、斑点杂交
  • E、Southern blotting

正确答案:C

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