试述生物样品预处理的必要性。 

题目
问答题
试述生物样品预处理的必要性。
参考答案和解析
正确答案: 根据生物样品内药物分析的对象和特点以及药物在生物样品内的存在形式、生物转化状况,欲进行体内药物及其代谢物测定,除少数情况将体液作简单处理后进行直接测定外,一般在测定之前需采取适当的样品预处理,即进行分离、净化、浓集、衍生化等,从而为药物的分析测定创造良好的条件。
药物在体内以多种形式存在,有原型药(游离型),有与生物分子形成的结合物(与蛋白结合型),有代谢物,有缀合物(与葡萄糖醛酸、硫酸形成的苷、酯等),需分别测定;待测物浓度很低,而生物样品的介质组分繁杂,有众多内源性成分(蛋白质、多肽、脂肪酸、色素、类脂等)和各种潜在的干扰物存在,还有一些共存药物以及各种外源性物质也会影响测定;待测药物类型众多,性质各异很难对样品规定固定的程序和方式,所以样品处理必须根据药物类型、理化性质、存在形式、浓度范围、测定目的、选取的生物样本类型及最后一步测定方法等多种因素,采取相应的分离步骤和净化技术。
解析: 暂无解析
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相似问题和答案

第1题:

生物样品中待测组分浓集的必要性及浓集的两种方法


参考答案:浓集的必要性样品在提取过程中被测组分得到纯化但因微量的组分分布在较大体积的提取溶剂中,由于进样量的限制,被测组分量可能达不到检测灵敏度,故需将被测组分浓集后再测定。
  两种浓集方法:末次提取时加入提取液尽量少;挥去提取溶剂法。

第2题:

试述生物样品分析的常用测定方法有哪些。    


正确答案: (1)光谱法
采用具有选择性的显色剂和反应条件,才可以不经分离提取,直接用比色法测定生物样品中的药物含量。比色法灵敏度不高,通常只能测定出1μg/mL浓度以上的样品。但该法快速、简便,对仪器设备要求不高。
荧光法具有较高的灵敏度,专属性也较强,但药物必须具有一定的化学结构才能产生荧光。药物中具有天然荧光者不多,通常需采用适当处理,常用化学引导荧光法,如紫外辐射氧化、水解或强酸脱水等,或用适当的荧光试剂与药物起偶合或缩合反应,产生荧光发生团。
(2)色谱法
经典的薄层色谱定量法,操作比较繁琐,准确性较差。不适用于体液中药物成分浓度的测定。高效薄层色谱法灵敏度较高,常用于生物样品中成分的测定,与气相色谱法、高效液相色谱法相比,也有其独特的优点,
高效液相色谱法在生物样品内药物分析中的应用已大大超过了其他分析方法。具有适用范围广,可在室温下进行;样品预处理简单;分离效率高,流动相选择范围广;可不经萃取和衍生化处理直接测定极性大的水溶性药物;检测方法多是非破坏性的,流出组分可回收;专一性较高等优点。
气相色谱法只要选择适当的色谱条件,母体药物、代谢物及其可能同时服用的其他结构相类似的药物都能得到很好分离,常作为建立其他生物样品内药物分析方法的参比方法。
高效毛细管电泳法有高压电泳的高速、高分辨率及高效液相色谱法的高效率等优点,其选择性与高效液相色谱有很大的互补性。广泛应用于生物大分子,体内药物及代谢物,手性药物,中、西药物及其制剂等的分析。
(3)联用技术
联用技术已广泛应用于复杂组分的分离与分析,成为分析技术中最重要的检测手段,尤其适合于对热不稳定的、挥发性差的或极性大的成分分析,高分辨的液相色谱与高灵敏度的质谱联用分析,特别适用于复杂生物样品中药物及其代谢物的研究。
(4)免疫分析法
免疫分析中按标记物的不同,可分为放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、荧光免疫分析等。根据抗原-抗体的反应达平衡后是否需将结合物(B)与游离标记物(F)分离,免疫分析可分为均相免疫分析和非均相免疫分析两大类。 各种免疫分析的基本原理是一样的,即竞争抑制原理。人工抗原的制备和特异抗体的制备也相同,只是标记抗原(标记药物)的标记物不同,由此产生的测定方法也不同。

第3题:

TDM中样品预处理的措施有

A、灰化

B、去蛋白

C、提取

D、化学衍生物化学反应

E、离子化


参考答案:BCD

第4题:

试述预处理生物样品时待测物的损失与玷污。 


正确答案:   在样品预处理过程中待测物的损失,是由容器的吸附、蛋白共沉淀、药物不稳定而产生化学降解或与重金属离子配合、衍生化反应不完全、浓缩过程中挥发等因素所致。样品的玷污问题,是由于生物样品内药物测定具有在复杂体系中测定痕量物质的特点,内源性和外源性污染将引起测量结果不可靠,误差变大。在通常实验环境中,所用器皿、材料(塑料、润滑油、滤纸、蒸馏水纯度等)、提取溶剂和衍生化试剂中夹杂的杂质、血样中脂肪酸及其酯类、人体的皮肤、手指接触容器所带入的杂质等都有可能玷污样品。以上这些问题严重时,会使整个测定毫无意义,甚至引起错误判断。

第5题:

生物样品预处理时,提取次数至多几次()

  • A、 1
  • B、 2
  • C、 3
  • D、 4
  • E、 5

正确答案:B

第6题:

在卫生理化检验中,尽量不用或少用样品预处理的原因是( )。

A.因为样品没有必要进行预处理
B.因为样品预处理会影响样品的性质
C.因为样品预处理可能使待测物损失,可能引入干扰物
D.因为样品预处理会增加操作步骤
E.因为样品预处理可使样品溶剂发生变化,而影响测定

答案:C
解析:

第7题:

试述生物样品预处理的必要性。 


正确答案: 根据生物样品内药物分析的对象和特点以及药物在生物样品内的存在形式、生物转化状况,欲进行体内药物及其代谢物测定,除少数情况将体液作简单处理后进行直接测定外,一般在测定之前需采取适当的样品预处理,即进行分离、净化、浓集、衍生化等,从而为药物的分析测定创造良好的条件。
药物在体内以多种形式存在,有原型药(游离型),有与生物分子形成的结合物(与蛋白结合型),有代谢物,有缀合物(与葡萄糖醛酸、硫酸形成的苷、酯等),需分别测定;待测物浓度很低,而生物样品的介质组分繁杂,有众多内源性成分(蛋白质、多肽、脂肪酸、色素、类脂等)和各种潜在的干扰物存在,还有一些共存药物以及各种外源性物质也会影响测定;待测药物类型众多,性质各异很难对样品规定固定的程序和方式,所以样品处理必须根据药物类型、理化性质、存在形式、浓度范围、测定目的、选取的生物样本类型及最后一步测定方法等多种因素,采取相应的分离步骤和净化技术。

第8题:

食品检验的基本步骤按照下列顺序进行,()、成分分析、数据的处理和分析报告的撰写等。

A.样品采集、样品预处理、样品的制备和保存

B.样品采集、样品的制备和保存、样品预处理

C.样品的采集、样品的保存、样品预处理、样品的制备

D.样品采集、样品的保存、样品预处理


本题答案:C

第9题:

试述生物样品分析方法的稳定性评价内容。


正确答案: 药物的稳定性是贮存条件、药物的化学性质、空白生物样品和容器系统的函数。在特定的容器和生物样品中待测物的稳定性不能外推至其他系统。在生物样品中待测物的稳定性包括长期贮存、短期贮存和冷冻-解冻循环过程的稳定性,也包括标准贮备液中待测物的稳定性。
(1)长期贮存稳定性
长期稳定性的贮存时间应超过收集第一个样品至最后一个样品分析所需用的时间周期。贮存温度一般为-20℃,如果需要也可在-70℃贮存。要求高、低浓度至少分别测定3次,与第一天测得的相应浓度的结果进行比较。
(2)短期室温稳定性 高、低浓度各3份于室温下放置4~24小时(根据实际操作在室温中需维持的时间而定),在不同时间点取样,进行分析,与0小时测得结果进行比较。
(3)冷冻-解冻稳定性
取高、低浓度样品至少各3份,于-20℃贮存24小时,取出置室温放置使自然融解。当融解完全后,取样,进行分析。然后再把样品放回冷冻状态保持12~24小时,如此解冻-冷冻应重复循环二次以上,然后比较各次分析结果。
(4)贮备液稳定性
药物与内标物贮备溶液的稳定性应对其在室温下至少6小时的稳定性进行考察,然后将其冷藏或冷冻7~14天或恰当周期后进行测定,所得仪器响应值与新鲜配制溶液所得响应值进行比较。

第10题:

生物样品测定前为什么要进行预处理?()

  • A、生物样品中被测物浓度低
  • B、成分复杂,干扰多
  • C、药物在体内以多种形式存在
  • D、蛋白质对测定有干扰
  • E、测定工作量大

正确答案:A,B,C,D