使用打孔全细胞膜片钳记录（perforated whole-cell patch clamp recording）的优点是什么？

题目

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第1题：

什么是膜片钳技术？它的基本工作原理是什么？

正确答案:膜片钳技术是一种能够记录膜结构中单一的离子通道蛋白质的开放和关闭的技术，即是测量单通道离子电流和电导的技术。基本工作原理：膜片钳技术是用玻璃微电极接触细胞，形成吉欧姆(GΩ)阻抗，使得与电极尖端开口处相接的细胞膜的膜片与周围在电学上绝缘，在此基础上固定电位，对此膜片上的离子通道的离子电流(pA级)进行监测记录的方法。

第2题：

如何判断膜片钳记录过程中已经形成良好的细胞封接？

正确答案: 在电极入液之前，给它施加一个较大的正压，有助于迅速形成良好的封接。电极入液后，液接电阻可以不补偿，当封接形成之后自然会消失。
电极刚入水时测试脉冲所引起的电流呈方波，其幅度与电极电阻成反比。电极尖端轻微触压细胞膜，电阻略有增大，噪声略有降低。形成封接后，电流方波几乎消失，噪声也急剧下降，两个尖峰是快电容引起的电流。
为证实封接的形成，可以增加放大器的增益，从而可以观察到除脉冲电压的首尾两端出现电容性脉冲尖端电流之外，电流波形仍呈平坦状。

第3题：

制作原种或栽培培养基时，散料装后，要打孔，打孔的目的是什么？

正确答案: a．增加瓶内氧气；
b．有利于菌丝沿着洞穴向下蔓延；
c．便于固定菌种块，不致因滑动而影响成活。

第4题：

全制式调整器的优点是什么？

正确答案:全制式调整器可以控制柴油机在规定转速范围内，任意转速下稳定运行。

第5题：

建立膜片钳记录系统大致需要哪些基本设备？

正确答案:膜片钳实验仪器设备主要有放大器、微型操纵器（微超）、倒置显微镜、防震台、屏蔽笼、灌流槽和数据采集和处理设（计算机）。其中膜片钳放大器（amplifier）、微型操纵器（微操micromanipulator）、倒置显微镜(inverted microscope)是膜片钳实验区别于一般电生理实验所需要的仪器。

第6题：

膜片钳技术的应用范围有哪些？

正确答案: 1）分辨单通道电流，直接观察通道的开闭过程。
2）区分离子通道的离子选择性及其门控性（如区分电压或化学门控性通道），发现新的离子通道及亚型。
3）在记录单个通道电流（i）和全细胞电流（I）的基础上，可分别计算出细胞膜上的通道数（n）和开放概率（p），依公式I=nip。
4）用以检测某些递质能否打开通道，或是否接受第二信使的调控（膜内面向外式）
5）研究细胞膜上的信使物质对离子通道型受体的调节机制（应用全细胞记录式）
6）研究不同离子对通道特性的影响及细胞内信使物质如对离子通道型受体的调节机制（内面向外膜片）
7）研究药物对电压或化学门控性通道的影响。

第7题：

膜片钳实验的主要影响因素是什么？

正确答案:减少噪音，避免电极前端的污染，封接的成功与否，选取正确的记录模式，如何选择电极内、外液，如何选择激动剂、阻断剂，正确的进行数据采集

第8题：

传统的全细胞膜片钳记录（conventional whole-cell patch clamp recording）过程中怎样进行质量控制？Quality control质量控制

正确答案: 1. 开始封接的电阻必须大于1兆欧。
2. 整个记录过程中，电阻必须低于20M。
3. 如果在正常高钾溶液内使用，膜电位必须低于-50mV。
4. 细胞的电容和电阻必须是稳定的

第9题：

记录单通道离子电流，须采用的是（）

A、膜电位细胞内纪录
B、电压钳技术
C、电压钳结合通道阻断剂
D、膜片钳技术
E、膜片钳全细胞纪录

正确答案:D

第10题：

跳线（patch cord）使用多股导体绞合电缆。

正确答案:正确

使用打孔全细胞膜片钳记录（perforated whole-cell patch clamp recording）的优点是什么？

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