试比较三大标记技术(荧光、放射、酶标记)异同、优缺点、应用。

题目

试比较三大标记技术(荧光、放射、酶标记)异同、优缺点、应用。

参考答案和解析
正确答案:免疫标记检测技术的共同特点:①用标记抗体(或抗原)检测,仍保留抗体(或抗原)的特异性,且提高了抗原抗体反应检出的敏感性;②将标记物加入反应体系中,使发生抗原抗体反应后,应将未结合的标记抗体(或抗原)从反应系统中洗除去;③洗去游离标记物后,检测抗原—抗体复合物中标记物的多少来判断结果。或以测定洗出的未结合的标记物多少来判断结果。依不同试验条件而定。
各种方法的不同点及应用:
(1)免疫荧光法:将荧光染料与抗体分子进行化学联接,即为荧光标记抗体,用此荧光抗体去染组织或带特异抗原的细胞,对相应抗原进行定量或定位检查,可有直接荧光法和间接荧光法,后者更常用且灵敏度高,也可用双重荧光检测,即一种抗体标记异硫氰荧光素(黄绿色),另一种抗体用藻红蛋白荧光色素标记(红色),可同时检测两种不同抗原,如用单克隆抗体检测T细胞的亚类,免疫荧光法需用特殊的荧光显微镜,或检出仪器如FACS。
(2)放射免疫法:根据竞争性结合的原理。定量的放射性同位素标记抗原与未标记抗原竞争结合定量的抗体。未标记的抗原加入越多,与抗体结合的标记的抗原越少,也就是未结合的标记抗原越多。在用活性炭或滑石粉吸附去除全部未与抗体结合的游离抗原,就可定量测定放射性核素标记的免疫复合物。如测血液中胰岛素含量,在胰岛素抗体和已知量的核素标记胰岛素的混合液中加入待检样品,最后测沉淀物中核素的含量,如果待检样品中含胰岛素量越大,则沉淀物上含放射性核素量越少。放射免疫法极为敏感,多用于检测激素(胰岛素、甲状腺素、醛固酮等)或蛋白质(甲胎蛋白,IgE、乙肝表面抗原)、维生素、药物、酶等。此法试剂昂贵,有放射性污染。
(3)酶标免疫法:某些酶可使底物产生颜色变化,将此酶与抗原或抗体联接,不影响各自原有的生物活性而制备出酶标抗原或抗体,用它来检测抗原或抗体即为酶免疫法。此法简便、快速、灵敏度高、应用广泛。常用的EHSA法有:双抗体夹心法用于测抗原,先将特异抗体包被塑料板,再加入抗原的待检标本,让抗原与固相载体表面包被的抗体结合,洗出未结合的材料,再加入抗同一抗原的酶标记抗体,再洗去未结合的酶标抗体,加底物显色,用ELISA仪器检测颜色光密度,作定量检测,光密度越高,待检样品中含有抗原量越高。
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相似问题和答案

第1题:

最先被用作免疫标记技术的标记物是

A.激素

B.放射性核素

C.酶

D.荧光素

E.生物素


正确答案:D

15.D。荧光免疫技术是Coons等于1941年首次采用异硫氰酸荧光素标记抗体,检测小鼠组织切片中的可溶性肺炎球菌多糖抗原而获得成功的,是最早应用的标记技术。

第2题:

免疫标记技术包括( )

A、酶标抗体技术

B、间接荧光标记技术

C、同位素标记技术

D、ELISA

E、以上都是


参考答案:E

第3题:

免疫标记技术包括()

A.酶标记技术

B.荧光标记技术

C.同位素标记技术

D.以上都是

E.以上都不是


正确答案:E

第4题:

免疫标记技术不包括

A、酶免疫测定法

B、荧光免疫技术

C、免疫放射分析

D、放射免疫技术

E、PCR技术


参考答案:E

第5题:

以下哪些属于血清学反应?( )

A、补体结合反应

B、酶标记技术

C、放射性核素标记技术

D、免疫荧光技术

E、沉淀反应


参考答案:ABCDE

第6题:

免疫标记技术包括( )。

A.酶标技术

B.荧光标记技术

C.同位素标记技术

D.以上都是

E.以上都不是


正确答案:D
根据抗原抗体结合的特异性和标记分子的敏感性建立的技术,称为标记抗体技术。高敏感性的标记分子主要有荧光素、酶、放射性同位素三种,由此建立免疫荧光抗体技术、免疫酶标记技术和放射免疫分析。

第7题:

用荧光素、酶、放射性同位素等标记已知的抗体或抗原,进行的抗原抗体反应,称为()。

A、免疫荧光技术

B、酶免疫技术

C、放射免疫测定法

D、免疫标记技术

E、ELISA


参考答案:D

第8题:

最早建立的标记技术是

A.放射免疫技术

B.酶免疫技术

C.化学发光技术

D.时间分辨荧光免疫分析

E.荧光免疫技术


正确答案:E

第9题:

免疫标记技术常用的标记物有()

A、荧光素

B、酶

C、琼脂凝胶

D、放射性核素

E、血清蛋白质


答案:ABD

第10题:

关于胶体金标记技术叙述正确的是

A、胶体金标记技术使用荧光作为标记物

B、胶体金标记技术使用放射性核素作为标记物

C、胶体金标记技术使用酶作为标记物

D、胶体金标记技术是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的过程

E、胶体金标记技术的缺点是所需试剂量较大


参考答案:D