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简述基因重组中载体应具备的基本性质和特征。

题目
问答题
简述基因重组中载体应具备的基本性质和特征。
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第1题：

遗传基因工程的主要内容包括

A．载体和目的基因的分离

B．限制性内切酶的切割，并把载体和目的基因合成重组

C．DNA重组体的转化表达

D．DNA重组体的扩增、筛选与鉴定


正确答案：ABCD
解析：DNA克隆就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增、提取获得大量同——DNA分子，即DNA克隆。实现基因克隆所采用的方法及相关的工作统称重组DNA技术，又称基因丁程。一个完整的DNA克隆过程应包括：目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导入宿主细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞(转化子)。

第2题：

遗传工程的主要内容包括( )

A.载体和目的基因的制备
B.限制性内切酶的切割，并把载体和目的基因合成重组体
C.DNA重组体的转化和表达
D.DNA重组体的扩增、筛选与鉴定

答案：A,B,C,D
解析：

第3题：

重组DNA技术的基本步骤包括

A、选择载体和获取目的基因

B、目的基因与载体酶切后连接

C、重组DNA导入受体细胞

D、筛选阳性克隆

E、分、切、接、转、筛


参考答案：ABCDE

第4题：

重组DNA技术包括（）

  • A、制备目的基因DNA片段
  • B、将目的基因与载体相连
  • C、将重组DNA导入受体细胞
  • D、筛选和鉴定DNA重组体
  • E、去除载体

正确答案:A,B,C,D

第5题：

简述载体应具备的特征。


正确答案: 1、在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；
2、必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制；
3、有一定的选择标记，用于筛选；
4、最好有较高的拷贝数，便于载体的制备。

第6题：

重组DNA基本过程包括


A.目的基因的获取
B.克隆载体的构建
C.目的基因与载体的拼接
D.重组分子导入受体菌

答案：A,B,C,D
解析：

第7题：

DNA重组体的构建是指（）。

  • A、对目的DNA片段作选择性扩增和表达的检测
  • B、选择目的基因和表达载体
  • C、将目的基因和载体在体外重组

正确答案:C

第8题：

请简述基因工程载体应具备的特点。


参考答案：(1)在宿主细胞内能独立复制
(2)有选择性标记
(3)有一段多克隆位点，外源DNA插入其中不影响载体的复制
(4)分子量小,拷贝数多
(5)容易从宿主细胞中分离纯化。

第9题：

简述基因工程载体的基本要求和特点？


正确答案: ①载体DNA是单个复制单元，在宿主细胞内应具有DNA独立复制能力。
②分子量尽可能的小，以便容易从细胞中分离纯化，便于离体条件下操作。
③含有多种限制性内切酶单一切点。在切点内可以与外源DNA进行连接、重组。
④载体内有不影响其复制、生长的非必要区域，在此区域内可以插入、接受外源DNA，外源DNA与载体分子一起复制、扩增。
⑤具有多种选择性标志，如营养缺陷型、抗药性、形成噬菌斑的能力、外源性蛋白的产生等，作为区分重组的转化子与非转化子的指标。

第10题：

何谓基因重组？简述基因工程的基本原理。


正确答案: 基因重组是指整段DNA在细胞内或细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，并能在新的位置上复制、转录和翻译。在进化、繁殖、病毒感染、基因表达以及癌基因激活等过程中，基因重组都起着重要作用。基因重组也可归类为自然突变现象，它可有多种方式：（1）转化（transformation）：由外源DNA引起生物类型改变的过程，称为转化。如将有毒型肺炎双球菌的DNA和无毒型肺炎双球菌一起培养，产生的子代为有毒型肺炎双球菌。（2）整合：λ噬菌体感染大肠埃希菌时，可将其所含λDNA注入菌体内。λDNA在菌体内可与细菌的染色体重组，成为细菌染色体的一部分，这称为整合。整合了噬菌体基因组的细菌称为溶原菌。（3）转导（transduction）：将噬原菌中噬菌体DNA切离时，噬菌体也会带走一部分邻近的宿主DNA。带有宿主DNA的噬菌体称为转导噬菌体，此过程称为转导。（4）转位（transposition）：转位是指一个或一组基因从一处转位到基因组的另一位置，这些游动的基因称为转位子。免疫球蛋白即通过基因转位和重组而生成。基因工程是用分离纯化或人工合成的DNA在体外与载体DNA结合，成为重组DNA，用以转化宿主（细菌或其他细胞），筛选出能表达重组DNA的活细胞，继而使其纯化、传代、扩增，成为克隆。因此，基因工程也称基因克隆或重组DNA技术。

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