以胞内酶提取为例,简要说明双水相系统工业化萃取的主要流程及操作注意点。

题目
问答题
以胞内酶提取为例,简要说明双水相系统工业化萃取的主要流程及操作注意点。
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相似问题和答案

第1题:

下列双水相萃取特点叙述错误的是()。

  • A、可以在不经破碎的条件下操作直接提取胞内酶
  • B、双水相萃取条件苛刻
  • C、可以直接从含菌体的发酵液或培养液中直接提取
  • D、与通常的溶剂萃取方式相似

正确答案:B

第2题:

什么是双水相萃取?双水相萃取的优点是什么?


正确答案: 双水相萃取是利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。
易于放大双水相系统之间的传质过程和平衡过程快速,因此能耗较小,可以实现快速分离。易于进行连续化操作。

第3题:

以投诉处理流程为例,简要说明一线客服代表为处理好投诉,需要占有的资源。


正确答案:客服知识库、客服系统、工单流转系统等支撑系统,客服代表运用知识的能力和技能以及授予一线服务人员的权限等。

第4题:

双水相萃取在蛋白质的提取分离中具有较好的应用潜力。请谈谈你对双水相萃取的局限及今后发展方向的理解。


正确答案:局限:易乳化,相分离时间长,成相聚合物成本高,水溶性高聚物大多数粘度大,不易定量控制,水溶性高聚物难以挥发,使反萃剂必不可少,高聚物的回收难;而且,目前对双水相体系的双水动力学研究,双水相萃取设备流程研究,成相聚合物的重复利用以及普通有机物-无机物双水相体系等方面相关文献报道比较少,有待进一步研究和开发。
发展方向:开发廉价的新型双水相体系,双水相分配与相关技术的集成化,双水相萃取过程的开发,双水相萃取相关理论的发展,亲和双水相萃取技术。

第5题:

简述双水相萃取主要步骤。


正确答案: (1)细胞破碎匀浆,双水相萃取
目标蛋白分配在上相-PEG相,细胞碎片及其它杂质分配在下相-盐相;
(2)除去上相核酸及多糖
上相加入适量盐,除去核酸及多糖,而蛋白质保留在上相.
(3)目标蛋白转移到下相而与上相PEG分离
上相加入适量盐或调PH,使目标蛋白转移到下相-盐相,而与上相PEG分离

第6题:

双水相萃取的概念是什么?为什么要进行双水相萃取?双水相萃取的主要操作原则是什么?如何做到?


正确答案: 双水相萃取:
利用被提取物在二相中的分配不同而实现分离的目的;由于蛋白质在有机相中容易失活,因此采用的二相均为亲水相,如PEG/葡聚糖、PEG/无机盐等,称为双水相,两相密度不同,轻相富含一种高分子,重相可能富含另一高分子,细胞碎片和蛋白质在二相间的分配系数不同,从而实现分离的目的。
双水相萃取的一般原则:
一般的原则是将碎片分配在下层(调节PEG和无机盐浓度比例,可以控制细胞碎片在上下层间的分配)其好处有:
核酸等大部分杂质一般处于下相,可以一并除去;
下相是无机盐富集相,作为废弃物成本低些;
蛋白质保持于上相的PEG层有利于其活性的保持;
碎片在下相有利于离心机的连续分离。

第7题:

双水相萃取的典型流程是什么?双水相有哪些应用?


正确答案: 双水相萃取的工艺流程一般包括三部分:
(1)目的物的萃取
(2)PEG的循环
(3)无机盐的循环
应用:
1、双水相萃取细胞、细胞器和膜
2、双水相萃取技术在分离中应用
3、从破碎的细胞中萃取分离酶
4、双水相提取酶蛋白

第8题:

双水相萃取、反胶束萃取、超临界流体萃取基本原理及各自的优点?


正确答案:(1)超临界流体萃取
原理:利用处于临界压力和临界温度以上的一些溶剂流体所具有特异增加物质溶解能力来分离纯化的技术。
优点: ①具有广泛的适应性:
②萃取效率高,过程易于调节:
③分离工艺流程简单:
④有些分离过程可在接近室温下完成
缺点:分离过程必须在高压下进行,设备及工艺技术要求高,投资比较大,普及应用较为困难
(2)双水相萃取
原理:利用生物物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异进行分离的过程。
优点:保留产物的活性、可连续化操作
(3)反胶束萃取
原理:表面活性剂溶于非极性溶剂中,并使其浓度超过临界胶束浓度,便会在有机溶剂内形成聚集体,非极性基团在外,极性基团则排列在内,形成一个极性核,此极性核具有溶解极性物质的能力。
优点:具有成本低、溶剂可反复使用、萃取率和反萃取率都高等。

第9题:

什么叫双水相萃取技术?在生物产业中双水相萃取法常用于何种物质提取?


正确答案:双水相萃取技术是指亲水性聚合物水溶液在一定条件下可以形成双水相,由于被分离物在两相中分配不同,便可实现分离。
双水相萃取法常用于胞内酶提取,双水相系统可用于细胞碎片以及酶的进一步精制。

第10题:

以胞内酶提取为例,简要说明双水相系统工业化萃取的主要流程及操作注意点。


正确答案: (1)主要流程:使用PEG/盐系统提取胞内酶时,可先使细胞碎片分配到下相,使蛋白质分配在上相;分离后,上相中的蛋白质可以加入适当的盐,进行二次双水相萃取,目的是利用盐相(下相)去除核酸和多糖;上相中的蛋白质进行第三次萃取,通过pH调节,使上相含色素,蛋白质分配在盐相,以便通过超滤将其和主体PEG分离,主体PEG可循环使用。
(2)操作注意点:实验放大的主要依据是分配系数,遇到的主要问题是细胞碎片相的粘度问题、萃取平衡时间以及相分离问题。需要带低速搅拌和溢流装置的混合-沉降系统;上下相分离利用重力沉降能耗成本低,但高粘度体系要选用离心分离;改变条件再次萃取并结合超滤、透析等处理可实现多聚物的彻底分离。