酶基因克隆的主要操作步骤包括()

题目
多选题
酶基因克隆的主要操作步骤包括()
A

目的酶基因的获取

B

构建重组表达载体

C

重组载体导入受体细胞

D

加入诱导剂使目的酶表达

E

对重组子进行筛选与鉴定

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第1题:

DNA克隆过程不包括以下步骤


A.获取目的基因
B.选择与构建载体
C.筛选转化子
D.载体基因DNA测序

答案:D
解析:

第2题:

简述体外克隆基因的操作。


正确答案:(1)从复杂的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等步骤,分离出带有目的基因的DNA片段;
(2)在体外,将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自我复制的并具有选择记号的载体分子上,形成重组DNA分子;
(3)感受态细胞的制备—氯化钙法
(4)转化(transformation)
感受态细胞与连接产物轻轻混匀,冰浴30min,42℃水浴热激60–90s,快速冰浴2min加液体LB振荡培养,使细胞复苏。
(5)筛选(screening)
①根据重组载体的表型【抗药性(Ampr、Tetr)、其他mark(a-互补筛选)】
②根据DNA限制酶的酶谱分析
③PCR反应

第3题:

重组DNA技术的基本步骤包括

A、选择载体和获取目的基因

B、目的基因与载体酶切后连接

C、重组DNA导入受体细胞

D、筛选阳性克隆

E、分、切、接、转、筛


参考答案:ABCDE

第4题:

链霉菌基因克隆的基本步骤有哪些?


正确答案: 链霉菌基因克隆的基本步骤:
(1)制备供体DNA片段;
(2)制备载体DNA;
(3)连接载体和供体DNA片段;
(4)将受体菌制成原生质体;
(5)将连接了供体DNA片段的载体对受体菌的原生质体进行转化;
(6)让原生质体再生细胞壁,随后对转化的细胞进行选择。

第5题:

下列()不是基因重组和克隆操作中最重要的工具。

  • A、限制性内切酶
  • B、载体
  • C、Taq酶
  • D、宿主菌

正确答案:D

第6题:

基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤,其中基因工程的核心是()

  • A、目的基因的获取
  • B、基因表达载体的构建
  • C、将目的基因导入受体细胞
  • D、目的基因的检测与鉴定

正确答案:B

第7题:

基因工程的操作步骤包括以下几步,正确的操作顺序是() ①目的基因与运载体结合; ②将目的基因导入受体细胞; ③目的基因的检测与鉴定; ④提取目的基因。

  • A、④①②③
  • B、②④①③
  • C、③②④①
  • D、③④①②

正确答案:A

第8题:

DNA克隆过程的步骤中不包括

A.获取目的基因

B.选择与构建载体

C.目的基因与载体的拼接

D.载体基因DNA测序

E.筛选转化子


正确答案:D

第9题:

下列哪项不是分子克隆的主要步骤()

  • A、目的基因的表达
  • B、基因文库的建立
  • C、目的基因的筛选
  • D、目的基因的分析

正确答案:A

第10题:

概述基因克隆的基本步骤。


正确答案: 基因克隆的基本步骤有:
①用相互配套的1~2种限制酶切割含目的基因的DNA和载体DNA(切);
②连接目的基因和载体DNA得到重组载体(接);
③将重组载体导入宿主细胞(转),若使用的是质粒载体,称转化,噬菌体载体称转导,病毒载体称转染;
④将经过转化(或转导,转染)的细菌或细胞稀释,在加有选择性培养基的平皿培养基或细胞培养板上培养,选择含目的基因的阳性克隆,并用其它方法进一步鉴定(筛);
⑤扩大培养选出的阳性克隆(扩)。随后可分离目的基因,或在一定的条件下表达目的基因。