基于质谱技术研究蛋白质相互作用的基本步骤主要包括（）。A、靶蛋白制备B、噬菌体显示技术C、酵母双杂交D、蛋白质复合体的纯化E、蛋白质复合体的质谱鉴定

题目

基于质谱技术研究蛋白质相互作用的基本步骤主要包括（）。

A、靶蛋白制备
B、噬菌体显示技术
C、酵母双杂交
D、蛋白质复合体的纯化
E、蛋白质复合体的质谱鉴定

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第1题：

基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有（）。

A、串联亲和纯化耦联质谱技术
B、噬菌体显示技术
C、亲和层析耦联质谱技术
D、生物传感器耦联质谱技术
E、免疫共沉淀耦联质谱技术

正确答案:A,C,D,E

第2题：

简述蛋白质质谱分析技术的步骤和原理。

正确答案: 原理：是通过电离源将蛋白质分子转化为离子，然后利用质谱分析仪的电场、磁场将具有特定质量与电荷比值（M/Z）的蛋白质离子分离开来，经过离子检测器收集分离的离子，确定离子的M/Z值，分析鉴定未知蛋白。通常结合相应的处理及其他技术，能够比较准确、快速地鉴定蛋白质。
步骤：将感兴趣的蛋白点回收后，进行胰蛋白酶胶内酶解，收集酶解肽段。
一级质谱将蛋白酶降解后的肽段按照质荷比以及强度进行分析，形成肽指纹图谱（PMF）；
二级质谱是挑选一级质谱中有代表性的母离子峰以诱导碰撞解离方式打碎，形成肽段碎片指纹图谱（PFF）；
然后一级PMF和二级PFF数据，进行数据库搜索，获取蛋白质的具体鉴定信息。

第3题：

下列哪些是新近蛋白质相互作用的体外研究方法 ( )

A、蛋白质工程中的定点诱变技术

B、生物传感芯片质谱

C、酵母双杂交

D、噬菌体展示

E、免疫诱导

参考答案：ABCD

第4题：

简述蛋白质免疫印迹法的基本原理和主要操作步骤。

正确答案: 蛋白质印迹法又称蛋白质免疫印迹法，是20世纪70年代末80年代初在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定的基础上发展起来的蛋白质检测技术，为检测样品中是否存在蛋白质抗原提供了一种可靠的方法。该法鉴定蛋白质的原理是根据被测蛋白能与特定抗体的结合特性和该蛋白的相对分子质量。
免疫印迹法程序可分为5个步骤：
（1）蛋白样品的制备；
（2）经过SDS-PAGE分离样品；
（3）分离的蛋白转移到膜载体上，转移后首先将膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附；
（4）用固定在膜上的蛋白质作为抗原，与对应的非标记抗体（一抗）结合；
（5）洗去未结合的一抗，加入酶耦联或放射性同位素标记的二抗，通过显色或放射性自显影法检测凝胶中的蛋白成分。

第5题：

稳定蛋白质结构的作用力包括。（）

A、范德华相互作用
B、氢键
C、静电相互作用
D、疏水相互作用

正确答案:A,B,C,D

第6题：

基于状态测试的主要步骤？

正确答案:①依据设计文档，或者通过分析对象数据成员的取值空间（笛卡尔积），得到被测试类的状态转移图；
②给被测试的类加入用于设置和检查对象状态的新方法，导出对象的逻辑状态；
③对于状态转移图中的每个状态，确定该状态是哪些方法的合法起始状态，即在该状态时，对象允许执行哪些操作；
④在每个状态，从类中方法的调用关系图最下层开始，逐一测试类中的方法；
⑤测试每个方法时，根据对象当前状态确定出对方法的执行路径有特殊影响的参数值，将各种可能组合作为参数进行测试。

第7题：

是研究基因工程产品蛋白质间相互作用的技术（）

A、二维凝胶电泳
B、图像分析技术
C、质谱技术
D、蛋白质芯片技术
E、噬菌体展示

正确答案:E

第8题：

下列哪些是新近蛋白质相互作用的体外研究方法（）。

A、蛋白质工程中的定点诱变技术
B、免疫沉淀
C、酵母双杂交
D、噬菌体显示技术
E、生物传感芯片质谱

正确答案:A,C,D,E

第9题：

干蛋白质与风味物质的结合主要通过（）、（）和（）。对于液态和高水分物质，蛋白质结合风味物质的机制主要包括（）与蛋白质表面的（）的相互作用。

正确答案:范德华力；氢键；静电相互作用；非极性配位体；疏水小区或空穴

第10题：

目前用于蛋白质鉴定的质谱主要有（）和（）。

正确答案:基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱；电喷雾质谱

基于质谱技术研究蛋白质相互作用的基本步骤主要包括（）。

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