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什么是基因组文库（genomiclibrary）？构建基因组文库

题目

什么是基因组文库（genomiclibrary）？构建基因组文库，涉及哪些基本过程？它同遗传学上的基因库有什么不同？

参考答案和解析
正确答案: 基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：
（1）高分子量染色体DNA的制备；
（2）体外重组连接；
（3）包装蛋白的制备；
（4）重组体的体外包装；
（5）将重组DNA导人寄主细胞；
（6）筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库（genepool）是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、YAC文库、BAC文库等。
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第1题：

基因组文库和cDNA文库区别相比，基因组文库所含基因（）

  • A、种类较多
  • B、无内含子
  • C、无启动子
  • D、在不同物种间不能交流

正确答案:A

第2题：

简述基因组文库构建的基本操作？


正确答案:①载体DNA的制备；
②基因组DNA的提取；
③基因组DNA的部分酶切、分离与回收；
④载体与外源片段的连接与转化或侵染宿主细胞；
⑤重组克隆的挑选和保存。

第3题：

以下关于cDNA文库和基因组文库的关系说法正确的是()

A、cDNA文库比基因组文库大

B、cDNA文库比基因组文库小

C、cDNA文库和基因组文库一样大

D、二者大小随机，不能比较


参考答案：B

第4题：

请设计试验，构建理想的小鼠基因组文库。


正确答案:一、分离纯化基因组DNA。用小鼠的肝脏来提取DNA：
①取适量的新鲜肝脏制备组织匀浆。
②加入细胞裂解液使细胞充分的裂解。
③加入蛋白酶K消化细胞，注意混匀但是不能太剧烈以免DNA断裂。
④加氯仿去除蛋白质。混匀后离心后，分三层上层是DNA，这一步吸取上层时最好用剪过的枪头避免吸入蛋白质等杂质。
⑤加入异丙醇出现絮状物，离心去除上清液，加入氯化钠溶解沉淀，加入RNA酶去除RNA。
⑥乙醇洗涤DNA沉淀，并用TE缓冲液溶解。
⑦琼脂糖电泳检测DNA的质量。
二、切割DNA成合适的片段以用于克隆。将DNA切割成大小为4~10kb的片段。
三、载体DNA的制备。用λ噬菌体载体。载体用Sau3A酶解，用氯化铯密度梯度离心。
四、基因组DNA与载体连接。连接反应中要考虑两个因素，即噬菌体两臂DNA插入片段的比例和反应混合液中DNA的浓度。
五、利用体外包装系统将多联体组装成完整的颗粒。
六、重组载体转化受体感受态细胞
七、扩增DNA文库。大肠杆菌的液体培养基的培养。
八、基因组文库的鉴定。

第5题：

下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（）

  • A、cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因
  • B、如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同
  • C、cDNA文厍中的基因都市没有启动子
  • D、一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库往往只有一种

正确答案:B

第6题：

什么叫基因组文库？cDNA文库？有什么区别？


正确答案: 基因组文库（genomic DNA library）：指将基因组DNA通过限制性内切酶部分酶解后所产生的基因组DNA片段随机的同相应的载体重组、克隆，所产生的克隆群体代表了基因组DNA所有的序列。
cDNA文库（cDNA library）：指只包括在特定组织或细胞类型中已经被转录成mRNA的所有的基因序列。
区别：
①重组DNA片段来源不同
基因组文库：来源于某特定生物个体的基因组DNA
cDNA文库：来源于细胞中表达出的mRNA
②使用范围不同
基因组文库：开展人类基因组计划研究，构建物理图谱等
cDNA文库：研究某特定细胞中基因组表达状态及表达基因的功能鉴定

第7题：

重组DNA技术中，目的基因的获取方法不包括（）

  • A、通过PCR合成
  • B、化学直接合成
  • C、构建cDNA文库
  • D、构建基因组文库
  • E、从基因组DNA中直接提取

正确答案:E

第8题：

cDNA文库在理论上


A.就是基因组文库
B.与基因组文库序列不同
C.包含了某一细胞在某一时期表达的全部遗传信息
D.包含的DNA序列比基因组文库少

答案：B,C,D
解析：

第9题：

构建基因组文库最常用的的方法是（）和（）部分消化法。


正确答案:λ噬菌体载体；限制性内切核酸酶

第10题：

M13噬菌体适用于（）。

  • A、构建基因组文库
  • B、构建cDNA文库
  • C、克隆较大的DNA片段
  • D、克隆单链外源DNA片段进行序列分析
  • E、以上都对

正确答案:D

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