试述胚胎细胞和体细胞核移植的操作方法。

题目

试述胚胎细胞和体细胞核移植的操作方法。

参考答案和解析
正确答案: 胚胎细胞移植操作程序
(1)卵母细胞的去核。目前常用荧光诱导去核法。荧光引导去核法先用Hoechst33342对卵母细胞染色10~15分钟,然后,在荧光显微镜下确定核的位置后去核。
(2)供体核的准备和移植。胚胎克隆过程中,供体核来自早期胚胎。供体核的准备实质上是把供体胚胎分散成单个卵裂球,每个卵裂球就是一个供体核。取得卵裂球的方法主要是用蛋白酶消化透明带,然后用微管把胚胎分散成单个卵裂球。准备好卵裂球后,用移植微管吸取一个卵裂球,借助显微操作仪沿着去核孔将卵裂球注入卵子的卵黄周隙中,即完成移植过程。
(3)融合。融和方法目前使用电融和法。电融和是将操作后的卵母细胞和卵裂球复合体放入电解质溶液中,在一定强度的电脉冲作用下,使卵裂球与卵子相互融合。在电击过程中,两者的接触要与电场方向垂直。
(4)激活。在胚胎核移植过程中,通常用一定强度的电脉冲作用卵母细胞,造成卵母细胞内外膜结构出现瞬时通道,胞质内的钙离子进入受体核区,激活细胞核,则恢复细胞周期,同时启动胚胎发育。
(5)重构胚的培养。重构胚可体外做短时间培养后,移植到受体内,也可以在中间受体或体外培养发育到桑葚胚或囊胚时,在进行冷冻保存或胚胎移植。
体细胞核移植的操作方法:和胚胎细胞克隆基本相同,主要差别在供体细胞的选择。体细胞克隆的核供体是体外培养传代的体细胞,根据Campell等人提出的方法,体细胞需经过血清饥恶,即细胞培养液中血清浓度由10%降至0.5%,继续培养5d左右,使细胞处于休止的G0期,再移植到去核卵母细胞的卵黄周隙中,经电融和激活后获得克隆胚胎,移植到受体后获得克隆后代。后来细胞不经血清饥恶,可以直接移入去核卵母细胞中生产克隆胚胎,并且已在小鼠和牛上获得成功。
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第1题:

下列说法正确的是()

  • A、动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整
  • B、胚胎细胞核的移植成功率远高于成体细胞
  • C、克隆羊多利是利用胚胎细胞进行核移植所得的个体
  • D、核移植后的重组细胞在最初分裂时就完成了DNA的复制和基因的转录

正确答案:B

第2题:

下列关于生物工程技术的有关叙述,不正确的是()

  • A、哺乳动物体细胞核移植的成功率小于胚胎细胞核移植
  • B、为了提高胚胎移植的成功率,需要利用激素对受体进行超数排卵处理
  • C、胚胎干细胞是一类未分化细胞,可从胎儿的生殖腺细胞中分离获取
  • D、“试管婴儿”是“体外受精”、“胚胎移植”的“产物”,不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇得到自己的孩子

正确答案:B

第3题:

我国制定的《人胚胎干细胞研究指导原则》规定中,允许

A.研究性克隆
B.通过体细胞核移植获得的囊胚培养已15天用于人胚干细胞研究
C.将人胚植入动物的生殖系统
D.将体细胞核移植获得的囊胚植入人的子宫
E.买卖人类配子、受精卵、胚胎

答案:A
解析:

第4题:

我国制定的,《人胚胎干细胞研究指导原则》规定中,允许()

  • A、研究性克隆
  • B、通过体细胞核移植获得的囊胚培养已15天用于人胚干细胞研究
  • C、将人胚植入动物的生殖系统
  • D、将体细胞核移植获得的囊胚植入人的子宫
  • E、买卖人类配子、受精卵、胚胎

正确答案:A

第5题:

下列对动物核移植技术的描述错误的是()

  • A、动物体细胞核移植的成功率明显低于胚胎细胞核移植
  • B、体细胞核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核
  • C、体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞
  • D、通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对提供体细胞核动物进行100%的复制

正确答案:D

第6题:

在多利羊的克隆工程中,没有用到的技术手段是()

  • A、细胞培养
  • B、体细胞核移植
  • C、胚胎移植
  • D、基因工程

正确答案:D

第7题:

在动物体细胞克隆技术中,不一定涉及()

  • A、卵母细胞的培养
  • B、细胞核移植
  • C、早期胚胎培养
  • D、导入外源基因

正确答案:D

第8题:

在克隆多利羊的过程中,没有运用的技术手段是()。

  • A、细胞培养
  • B、体细胞核移植
  • C、胚胎移植
  • D、基因工程

正确答案:D

第9题:

胚胎干细胞的制备方法不包括()。

  • A、成年人的生殖腺
  • B、囊胚的内细胞团
  • C、体细胞的核移植法
  • D、早期胚胎的生殖脊

正确答案:A

第10题:

有关治疗性克隆叙述错误的是()

  • A、核移植胚胎干细胞经过诱导分化,可以形成相应的组织、器官,用于移植
  • B、可以将患者的体细胞核植入去核的受体卵母细胞中,获得重组细胞
  • C、治疗性克隆的结果说明高度分化的体细胞仍具有全能性
  • D、治疗性克隆中包含的技术有胚胎干细胞培养技术和核移植技术

正确答案:C

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