杂交的步骤技术？

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杂交的步骤技术？

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第1题：

Souther杂交的过程一般分为哪几步骤？

正确答案:①DNA标本用限制性内切酶消化→②琼脂糖凝胶电泳分离各酶解片段→③DNA碱变性，Tris缓冲液中和→④高盐下通过毛吸作用将DNA转印到硝酸纤维素滤膜上，烘干固定（在凝胶中的相对位置在转移到膜的过程中仍保持着）→⑤附于膜上的DNA与P³²标记的探针杂交，利用放射自显影术确定探针互补的每条DNA带动位置。

第2题：

原位杂交是一种将核酸分子杂交技术与组织细胞化学和免疫组织化学结合起来的杂交方法，可以在不改变核酸的位置的情况下直接在“原位”进行分子杂交。菌落原位杂交的基本步骤是（）

A、裂解－影印－变性和中和－杂交－检测
B、裂解－影印－杂交－变性和中和－检测
C、影印－裂解－变性和中和－杂交－检测
D、影印－裂解－杂交－变性和中和－检测
E、影印－变性和中和－裂解－杂交－检测

正确答案:C

第3题：

按照杂交环境的不同，核酸分子杂交可分为固相分子杂交和液相分子杂交两种类型。其中固相分子杂交技术的应用更为普遍。用来鉴定DNA的分子杂交技术是A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、RFLP

E、免疫荧光技术

用来鉴定RNA的分子杂交技术是A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、RFLP

E、免疫荧光技术

参考答案：问题 1 答案：A

问题 2 答案：B

第4题：

杂交步骤是什么？

正确答案: 去雄、套袋、授粉。

第5题：

杂交育种步骤（杂交创新——横交固定——选育提高）：

正确答案: 1、确定育种目标和育种方案
2、杂交创新阶段：采用杂交使基因重组，改变原有类型的遗传基础，创造新的理想型个体。
工作：杂交、选种、选配、培育，对亲本的选择较重要，最好为当地品种，且在此阶段已完成选配（完成的标志：理想型个体的出现）
3、理想型横交定型阶段：将理想型个体停止杂交，改用杂种群内理想型个体自群繁育，稳定遗传基础获得固定的理想型，即理想型的横交固定。工作：采用同质选配、近交，加强选择，可考虑建立品系
4、扩群提高：迅速增加理想型个体数量和扩大其分布范围，培育新品系，建立品种整体结构和提高品种品质。

第6题：

用来研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验技术是（）。

A、酵母双杂交技术
B、原位杂交技术
C、RACE技术
D、SAGE技术
E、斑点杂交技术

正确答案:A

第7题：

请简述杂交育种的基本步骤。

正确答案: 杂交创新：采用杂交使基因重组，创造新的理想型个体。
自繁定型：将理想型个体停止杂交，改用杂种群内理想型个体自群繁育，稳定遗传基础获得固定的理想型。
扩群提高：迅速增加理想型个体数量和扩大其分布范围，培育新品系，建立品种整体结构和提高品种品质。

第8题：

单克隆抗体的制备目前使用的是

A、人-人杂交瘤技术

B、人-鼠杂交瘤技术

C、鼠-鼠杂交瘤技术

D、基因工程抗体技术

E、DNA重组技术

参考答案：C

第9题：

何谓杂交育种？杂交育种的一般步骤是什么？杂交育种也叫育成杂交，是指利用多品种间杂交能使彼此的优点结合在一起而创造新品种的杂交方法。一般包括：

正确答案: 1、杂交创新、
2、自繁定型、
3、扩群提高三个阶段、
4、推广应用。

第10题：

简述有性杂交步骤和方法

正确答案: （1）花粉的采集和贮藏：从具有典型性状的父本植株上，采集将要开放的发育良好的花蕾或花序，在室内取出花药于培养皿内。在室温条件下待其自然开裂后收集散出的花粉于小瓶中，贴上标签，注名品种，贮藏于低温、干燥、避光的条件下。
（2）杂交母株和花朵的选择：选择生长健壮、发育良好的单株和花蕾，疏去过多的非杂交用花蕾。
（3）去雄和隔离：对两性花品种为防止自交，在花蕾长大，花药成熟开裂之前去推。去雄后立即套袋。
（4）授粉和挂牌：待柱头出现粘液时，表示雌蕊成熟，即可授粉。连续授粉2－3次，能提高授粉效果。授粉后应立即封好套袋，挂上牌子，注明杂交组合、授粉日期等。
（5）杂交后的管理：当柱头完全枯萎后，可除去隔离袋，以免妨碍果实生长。要加强杂交母株的管理，注意观察记载。
（6）杂交种子的采收和处理：为了使种子能充分成熟，杂交果实宜适当迟采。果实采收后，应放在冷凉的地方后熟。

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