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单克隆抗体相关的技术包括（）

题目

单克隆抗体相关的技术包括（）

  • A、细胞融合
  • B、细胞培养
  • C、核移植
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第1题：

下列关于单克隆抗体的局限性叙述,错误的是

A、单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制它的应用范围

B、单克隆抗体不能用于凝集反应

C、单克隆抗体能用于沉淀反应

D、反应强度不如多克隆抗体

E、制备技术复杂，费时费工


参考答案：C

第2题：

单克隆抗体技术是植物细胞工程技术。（）


正确答案:错误

第3题：

流式细胞仪的技术构成包括()

A.集激光技术、电子物理技术

B.光电测量技术、电子计算机技术

C.细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术

D.以上皆是


答案：D

第4题：

试述制备单克隆抗体的原理是什么？用到的动物细胞工程技术手段有哪几种？单克隆抗体的特点有哪些？


正确答案:单克隆抗体的原理：要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。
手段：（1）灌注悬浮培养：连续灌注新的培养基，同时连续排出旧的培养液了，使细胞在一个相对稳定的环境中生长和繁殖，可提高细胞密度10倍以上
（2）贴壁细胞培养：由于大部分动物细胞无细胞壁，进行细胞培养时必须附在固体或半固体表面上培养，在固体载体表面上生长，并扩成一单层，称为单层培养法
（3）固定化细胞培养：采用载体使整个细胞固定化
单克隆抗体的特点：
（1）单克隆抗体是针对单一抗原决定的化学结构完全相同的单一抗体，其特异性强，与其对应抗原的亲和力高度均一
（2）制备时无需将抗原纯化，适于由未纯化的抗原大量制备。
（3）杂种瘤细胞株可冷冻于液氮中长期保存，所以单克隆抗体可以重复稳定的制备，不会因批号的不同而产生差异，只要使用来自同样杂交瘤的单克隆抗体，就能够以同一标准比较各研究室的数据。

第5题：

请回答下列有关单克隆抗体的问题：单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有（）的特点。其诱导融合的常用方法（）、（）、（）在单克隆抗体的制备过程中，运用的技术手段是（）、（）。


正确答案:特异强、灵敏度高；PEG；灭活病毒；离心电激等；细胞培养；细胞融合

第6题：

基因诊断的主要技术有


A.核酸分子杂交技术
B. PCR技术
C.生物芯片技术
D.单克隆抗体技术

答案：A,B,C
解析：

第7题：

回答下列有关生物工程技术的相关问题：单克隆抗体的最大优点是（），可大量制备。


正确答案:灵敏度高，特异性强

第8题：

简述单克隆抗体的制备过程及相关原理。


正确答案：基本原理：小鼠骨髓瘤细胞在体外适当条件下可无限增殖，但不能分泌抗体，而抗原免疫小鼠的脾细胞(B细胞)能产生抗体，但不能在体外无限增值。将两种细胞融合和就同时具有了无限增殖和分泌抗体的功能。过程：将上述骨髓瘤细胞与免疫的B细胞融合后，用含HAT(黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))的选择培养基进行培养，未融合的脾细胞因不能在体外无限增值而死亡，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏此黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)，不能利用此黄嘌呤而死亡。融合成功的杂交瘤细胞经筛选和克隆化建株，可获得能够产生某种特异性抗体的杂交瘤细胞。

第9题：

简述单克隆抗体的主要技术路线。


正确答案:单克隆抗体的制备：①动物免疫与亲本细胞的选择；②细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备；③杂交瘤细胞的筛选：有限稀释法等；④单克隆抗体的制备和冻存；⑤单克隆抗体的纯化
亲本细胞的选择：①骨髓瘤细胞：一般不分泌抗体，能在体外无限繁殖和连续继代培养，且为HGPRT－（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）或TK－（胸腺嘧啶核苷激酶）缺陷。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。②淋巴细胞：经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。③免疫方法：对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内，可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后，注入到动物体内。
细胞融合：将免疫脾细胞和小鼠骨髓细胞以2：1或10：1的比例混匀于50ml锥形离心管内，1200rpm离心；10分钟，尽量吸净上清液，用手指轻击管壁，使管底沉淀的细胞铺展成薄层，在室温条件下边轻轻振摇离心管边在60秒钟内逐滴加入50%的PEG0.5ml，随后静置90秒，再于5分钟内边振摇边逐滴加入5－10ml不含血清的培液或盐水缓冲液，以终止PEG的作用，再静置10分钟。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞：细胞团块分散后，加HAT溶液，即可加入有饲养细胞的96孔塑料培养板内每孔0.1ml，用HAT选择性培养时隔4－5天换液，8-10天后可以选择检测。
HAT选择系统：HAT是含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤A.及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关。

第10题：

标记免疫技术的发展与标记技术、单克隆抗体技术和分子生物学技术的发展紧密联系的。（　）


正确答案:正确

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