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简述凝胶层析分离的定义及原理

题目

简述凝胶层析分离的定义及原理

参考答案和解析
正确答案: 定义：凝胶层析又称为凝胶过滤，分子排阻层析，分子筛层析等。指以各种多孔凝胶为固定相，利用流动相中所含各种组分的相对分子质量不同而达到物质分离的一种层析技术。
原理：凝胶层析柱中装有多孔凝胶，当含有各种组分的混合溶液流经凝胶层析柱时，大分子物质由于分子直径大，不能进入凝胶的微孔，只能分布于凝胶颗粒的间隙中，以较快的速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶的微孔内，不断地进出于一个个颗粒的微孔内外，这就使小分子物质向下移动的速度比大分子的速度慢，从而使混合溶液中各组分按照相对分子质量由大到小的顺序先后流出层析柱，而达到分离的目的。
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相似问题和答案

第1题：

简述RFID的定义，组成及工作原理。


正确答案: 射频识别（RFID.，又称电子标签，无线射频识别。
RFID主要有三部分组成：标签，阅读器，天线。
标签进入磁场后，接收解读器发出的射频信号，凭借感应电流所获得的能量发送出存储在芯片中的产品信息，或者由标签主动发送某一频率的信号，解读器读取信息并解码后，送至中央信息系统进行有关数据处理，实现对被识别物体的自动识别。

第2题：

疏水柱层析分离原理？


正确答案: 亲水性蛋白质（酶）表面均含有一定量的疏水性基团。尽管在水溶液中蛋白质（酶）具有将疏水性基团折叠在分子内部而表面显露极性和荷电基团的趋势，但总会有一些疏水性基团或极性基团的疏水部位暴露在蛋白质（酶）表面。这部分疏水基团可与亲水性固定相表面偶联的短链烷基、苯基等弱疏水基会发生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附剂）所吸附。

第3题：

简述采用液态（凝胶）降阻剂的原理


正确答案：液态（凝胶）降阻剂采用高分子物质尿醛为主要材料加上其他化学物质配置成一种初始为液态，最后聚合成凝胶态的物质，该物质具有高导电性、无毒、中性的特点。在施工浇注时降阻剂呈现为一定稠性的液态，仍具有较好的流动性，可以渗透到土壤的缝隙中让这些液态降阻剂在土壤缝隙中渐渐变成凝胶态物质。这样做的好处是可以改善降阻剂与土壤的接触电阻。

第4题：

简述不连续凝胶电泳的原理


正确答案:不连续凝胶电泳的凝胶由样品胶、浓缩胶和分离胶三层组成，其中样品胶处于凝胶系统最上层的大孔径凝胶，在PH6.7~6.8的Tris-HCl缓冲液中聚合而成，含有欲分离的样品，有时可以不用这层样品胶，而直接将样品与10%的甘油或5%~20%的蔗糖混合后，加到浓缩胶的表面。浓缩胶在PH6.7~6.8的Tris-HCl缓冲液中聚合而成的大孔凝胶，除了不含样品外，其他与样品胶相同，样品中的各组分就在浓缩胶中浓缩，按照迁移率的不同，在浓缩胶和分离胶的界面上压缩成层。分离胶在pH8.8~8.9的Tris-HCl缓冲液聚合而成的小孔径凝胶，凝胶的孔径根据欲分离组分的大小通过丙烯酰胺的浓度进行调节，样品中各组分在分离胶中进行分离。在酶或其他蛋白质、核酸等进行不连续凝胶电泳时，采用阴离子电泳系统（采用pH8~9的电极缓冲液，组分带负电荷）。将制备好的多层凝胶置于电泳系统中，用pH8.3的Tris-甘氨酸缓冲液作为电极缓冲液进行电泳，样品中各组分在浓缩胶中浓缩成狭窄的高浓度样品层。这是由于在各层凝胶中都含有HCl，HCl的离解度大，几乎全部成为Cl-，Cl-在电场中移动速度最快，称为快离子；在电泳槽中含有甘氨酸，在样品胶和浓缩胶中pH为6.7~6.8，甘氨酸只有0.1%~1%离解为负离子，在电场中移动速度最慢，称为慢离子；而蛋白质或核酸的移动速度介乎快离子和慢离子之间。接通电源电泳开始后，Cl-快速移动，走在最前面，在其后面形成一个离子浓度较低的低电导区，低电导产生较高的电位梯度，这种电位梯度促使蛋白质等组分和慢离子在快离子后面加速移动，致使蛋白质等组分在快、慢离子之间浓缩成一狭窄的中间层。
当这一浓缩层的样品层进入分离胶的时候，由于分离胶的pH为9.5（配制分离胶时，pH为8.8~8.9，在电泳过程中，实测结果为9.5），使甘氨酸的解离度增加，泳动速度加快，很快超过所有的蛋白质等组分，高电位梯度消失，使蛋白质等组分在均一的电位梯度下进行电泳分离，加上分离胶的孔径较小，各组分因分子大小和形状不同受到分子筛效应，使某些静电荷相同的组分也可以得到分离。

第5题：

简述凝胶过滤分离氨基酸及蛋白质的原理。


正确答案:原理：不同分子大小的蛋白质流入凝胶层析柱时，比网孔的分子不能进入网状结构排阻在凝胶珠外，小的分子进入凝胶珠，由于不同大小的分子所经历的路径不同而得到分离。利用了凝胶的多孔性，根据溶剂分子的大小进行分离，大分子先洗下来，小分子后洗下来。

第6题：

简述凝胶法原理


正确答案:以凝胶作为支持介质，通过扩散进行的溶液反应生长；技术关键：避免过多的自发成核；高纯试剂，稀溶液，自发成核或籽晶。 高温溶液生长此方法中助熔剂的选择是个关键。

第7题：

凝胶层析分离机理


正确答案: 利用凝胶粒子为固定相，依据筛分原理，根据料液中溶质分子的相对分子质量进行分离。

第8题：

简述WDM的定义和基本原理及特点。


参考答案：WDM：波分复用系统
波分复用是光纤通信中的一种传输技术，它利用了一根光纤可以同时传输多个不同波长的光载波的特点，把光纤可能应用的波长范围划分成若干个波段，每个波段作一个独立的通道传输一种预定波长的光信号。光波分复用的实质是在光纤上进行光频分复用(OFDM)，只是因为光波通常采用波长而不用频率来描述、监测与控制。

第9题：

简述吸附柱层析分离原理？


正确答案:混合物中各成分对同一固定相移动相之间的吸附一解平衡不同，也就是各趁粉在两相的迁移速度不同而分离。混合物中极性大的化合物被吸附牢，迁移慢，后被洗脱。相反，极性小的化合物被吸附弱，迁移快，先被洗脱。

第10题：

简述分子筛层析分离酶蛋白的基本原理.


正确答案:凝胶过滤法是以不同蛋白质的分子量大小差异来将不同蛋白质分开的方法。最常用的凝胶是葡聚糖凝胶（Sephadex），是由葡聚糖和3-1，2环氧化丙烷（交联剂）相互交联而成的中央带有微孔的球状凝胶颗粒，根据凝胶分子的交联程度的不同，共有SephadexG10、G15、G25、G50、G75、G100、G150、G200等8种型号，G50以下的为硬胶，G75以上的为软胶。G10的交联度最高，分子内的网孔最小；G200的交联度最低，分子内网孔最大。根据蛋白质分子大小不同，在通过层析柱时，走的路程不同，从而分开

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