简述Taqman探针技术的原理。

题目

简述Taqman探针技术的原理。

参考答案和解析
正确答案: Taqman探针法是高度特异性的定量PCR技术,其核心是利用Taq酶的5’→3’外切核酸酶活性,切断探针,产生荧光信号,由于探针与模板是特异性结合,所以荧光信号的强弱就代表了模板的数量。在TaqMan探针法的定量PCR反应体系中,包括一对PCR引物和一条探针。探针只与模板特异性的结合,其结合位点在两条引物之间。探针的5’端标记有报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团,当探针完整的时候,报告基因所发出的荧光能量被淬灭集团吸收,仪器检测不到信号。随着PCR的进行,Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5’→3’外切核酸酶活性就会将探针切断,报告基团远离淬灭基团,其能量不被吸收,即产生荧光信号。所以,每经过一个PCR循环,荧光信号也和目的片段一样,有一个同步指数增长的过程。信号强度就代表了模板DNA的拷贝数。
根据其3,端标记的荧光猝灭基团的不同分为:普通的Taqman探针和TaqmanMGB探针。
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相似问题和答案

第1题:

简述货物跟踪技术原理。
货物跟踪的基本原理就是利用现代信息技术,收集物流全过程的信息,经过处理和传输,向有关业务机构和客户提供货物位置和状态的信息。
(1)静态货物跟踪。静态货物信息的跟踪利用过程,所采用的技术主要是信息识别与采集技术,如条码技术、射频技术等。
(2)在途货物跟踪。对在途货物的跟踪主要是利用全球定位系统(GPS)、地理信息系统(GIS)以及移动通信(GSM)技术,通过对运输工具(车辆、船只、飞机等)的跟踪管理来实现的。具体方法是:在装载作业时,确定货物与运输工具(通过装载清单),通过对运输工具的跟踪,查询货物位置。

第2题:

简述双重荧光标记探针PCR技术检测HVC-RNA。


正确答案:双重荧光标记探针PCR技术除了常规PCR的一对引物外,增加了一个特异性探针。该探针携带两个波长不同的光素,在无特异性DNA存在时,探针上携带的两个荧光基因间距离太近,其中A荧光素所发射的荧光被B荧光素发射的荧光掩盖,此时在监测器上只能测定出B荧光素所发射的荧光;当特异性DNA存在时,伴随DNA扩增,荧光标记探针将被DNA多聚酶水解,A荧光素随之游离出来,A荧光素发射的荧光随之变强,动态观察荧光强度的变化,可对HCV-RNA进行较准确的定性和定量分析。

第3题:

关于定量PCR,错误的是

A、可以定量或半定量检测PCR产物的方法

B、定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测

C、水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间

D、分子信标在自由状态下为发夹结构,荧光信号极低

E、定量PCR在封闭状态下进行,有效避免了产物的实验室污染


参考答案:A

第4题:

遗传性疾病的基因诊断不能离开对遗传标记的合理运用。请回答下列问题。以下属于杂交方法的是()

  • A、SSCP
  • B、基因芯片技术
  • C、DHPLC
  • D、PCR-RFLP
  • E、Taqman技术

正确答案:B

第5题:

最早推出的荧光定量探针是()

  • A、TaqMan探针
  • B、相邻探针
  • C、分子信标
  • D、阴阳探针
  • E、端粒探针

正确答案:A

第6题:

简述令牌环技术的原理。
令牌环网络中的每个工作站点都以固定的顺序传送一个被称为“令牌”的帧,收到此令牌的节点,如果需要传送数据,则会检查令牌是否空闲,若为空置,则将数据填入令牌中,并设置为忙碌,接着将令牌传给下一个节点。
由于令牌已经设置为忙碌,所以,接下来的节点只能将帧传给下一个节点,直到传到目的端。目的节点会将此令牌的内容复制下来,并设置令牌为已收到,然后传向下一个节点,当令牌饶了一圈会到源节点时,源节点会清除令牌中的数据,并将令牌置为空置传给下一个节点,接下来的节点有可以使用这个令牌来发送它要发送的数据了。

第7题:

用电容-电压技术来测量扩散剖面分布是用了()的原理。

  • A、pn结理论
  • B、欧姆定律
  • C、库仑定律
  • D、四探针技术

正确答案:A

第8题:

应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的,下面有关基因探针的描述正确的是(  )。

A.基因探针是检测疾病的医疗器械
B.基因探针是用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
C.基因探针检测疾病的原理是,测定并比较基因探针与被检测病毒的DNA碱基序列
D.一种基因探针可检测多种疾病或病毒

答案:B
解析:
探针是指能与特定靶DNA分子发生特异性作用、并能被特定方法探知的分子。基因探针是指用放射性同位素或荧光分子标记的DNA单链,工作原理是碱基互补配对原则.一种基因探针可检测一种疾病或病毒,B项正确。

第9题:

TaqMan探针采用的是()

  • A、荧光标记的探针
  • B、生物素标记的探针
  • C、同位素标记的探针
  • D、SYBR Green标记引物
  • E、圆形探针

正确答案:A

第10题:

边缘刻蚀冷热探针的工作原理?


正确答案:热探针和N型半导体接触时,传导电子将流向温度较低的区域,使得热探针处电子缺少,因而其电势相对于同一材料上的室温触点而言将是正的。同样道理,P型半导体热探针触点相对于室温触点而言将是负的。此电势差可以用简单的微伏表测量。